目的 探讨随机噬菌体十二肽库筛选血型D抗原模拟多肽的影响因素,以建立最佳筛选方案.方法 对比洗脱时间分别为4、8、12、16和30 min的洗脱液滴度;3轮清洗缓冲液中Tween 20浓度分别为0.1％、0.2％、0.5％和分别为0.1％、0.5％、0.5％时每轮淘洗的投入/产出比,以及3轮封闭缓冲液均为0.5％ BSA和分别为0.5％ BSA、1％明胶、5％脱脂奶时每轮淘洗的投入/产出比,以分析筛选效果,得出最佳筛选方案.对采用最佳筛选方案筛选得到的阳性克隆测定其DNA序列和做抗体竞争抑制试验检测D抗原模拟表位.结果 洗脱8 min时洗脱液滴度为(2.3t±0.25)×106 pfu/mL,洗脱4、12、16和30 min时的洗脱液滴度与之相比明显下降(P＜0.01).当洗脱时间为8 min且3轮封闭缓冲液均为0.5％ BSA时,3轮淘洗清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1％、0.5％、0.5％时投入/产出比分别为1.69×107、4.95×105、9.58×102,与清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1％、0.2％、0.5％时投入/产出比分别为2.70×107 、4.57 × 105、1.14×103相比,对筛选效果影响不大.当洗脱时间为8 min且3轮淘洗清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1％、0.5％、0.5％时,3轮封闭缓冲液分别为0.5％BSA、1％明胶、5％脱脂奶时投入/产出比分别为1.93×107、6.44×103、6.23×101,明显优于3

作者：吴凡；庄乃保；张印则；徐华；周华友；李康生

来源：中国输血杂志 2016 年 29卷 8期