目的 探讨miR-214通过靶向调控E2F转录因子3(E2F3)抑制肝癌细胞的增殖.方法 RT-PCR法检测细胞株SMMC-7721、HepG2、SK-Hep-1和Huh 7中miR-214的表达量,并利用脂质体转染miR-214 NC及miR-214 mimics.采用MTT法检测miR-214对肝癌细胞活力的影响;Hoechst染色试剂盒检测miR-214对细胞凋亡的影响,流式细胞术检测miR-214对细胞周期的影响;Western blot及RT-PCR法检测miR-214对肝癌细胞中E2F3蛋白及mRNA表达量的影响,并通过荧光素酶报告基因进行验证.结果 SMMC-7721、SK-Hep-1、Huh 7及HepG2中miR-214的表达量分别为(0.83±0.08)、(0.32±0.03)、(0.33±0.03)、(0.08±0.01),其中HepG2中miR-214表达量最低,因此选用HepG2作为后续实验细胞株.HepG2细胞转染miR-214 NC及miR-214 mimics、miR-214 mimics组中miR-214表达量(0.65±0.06)明显高于miR-214 NC组(0.14±0.01),miR-214 mimics组细胞活力(0.35±0.03)明显低于miR-214 NC组(0.69±0.06),miR-214 mimics组细胞凋亡率(36.37±3.43)
作者:杜朝阳;杨如玉;李超;段丽娟
来源:中国比较医学杂志 2017 年 27卷 6期