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目的 探究miR-3917在结肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞增殖和迁移中的作用及相关信号通路机制.方法 应用GEO2R分析工具对miRNA表达数据集(GSE101502)进行比较分析,获取在CRC组织中差异表达的miRNA.在TCGA数据库的样本表达数据中验证目的miRNA的表达水平.进一步通过qPCR检测miR-3917在人正常结肠细胞系(CCD841 CoN)和CRC细胞系(HCT 116)中的表达水平.通过在HCT 116细胞中转染miR-3917的模拟物(miR-mimic)上调其表达,并利用qPCR检测验证.通过CCK-8实验和平板克隆形成实验检测细胞的增殖.通过划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞的迁移.通过TargetScan对miR-3917的靶基因进行预测并利用DA-VID数据库对其进行富集分析.通过Western blot检测β-catenin核蛋白的表达以评价Wnt/β-catenin信号通路的激活水平.结果 共有21个差异表达的miRNA(Log2 | Fold Change |>1,P<0.05),其中与正常组织相比较,CRC组织中上调的有2个,下调的有19个.miR-3917在CRC组织中的表达显著下降(P<0.05).与CCD841 CoN细胞系相比,HCT 116细胞中miR-3917的表达显著降低(P<0.05).在HCT 116细胞中转染miR-mimic可以显著上调miR-3917的表达(P<0.05).与对照组相比,miR-mimic组中HCT 116细胞的增殖(CCK-8实验,P<0.05;平板克隆形成实验,P

作者:吴坤;姜洋

来源:中国实验诊断学 2024 年 28卷 1期

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作者:
吴坤;姜洋
来源:
中国实验诊断学 2024 年 28卷 1期
标签:
miR-3917 Wnt/β-catenin信号通路 结肠癌 细胞增殖 细胞迁移 miR-3917 Wnt/β-catenin signaling pathway colorectal cancer cell proliferation cell migration
目的 探究miR-3917在结肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞增殖和迁移中的作用及相关信号通路机制.方法 应用GEO2R分析工具对miRNA表达数据集(GSE101502)进行比较分析,获取在CRC组织中差异表达的miRNA.在TCGA数据库的样本表达数据中验证目的miRNA的表达水平.进一步通过qPCR检测miR-3917在人正常结肠细胞系(CCD841 CoN)和CRC细胞系(HCT 116)中的表达水平.通过在HCT 116细胞中转染miR-3917的模拟物(miR-mimic)上调其表达,并利用qPCR检测验证.通过CCK-8实验和平板克隆形成实验检测细胞的增殖.通过划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞的迁移.通过TargetScan对miR-3917的靶基因进行预测并利用DA-VID数据库对其进行富集分析.通过Western blot检测β-catenin核蛋白的表达以评价Wnt/β-catenin信号通路的激活水平.结果 共有21个差异表达的miRNA(Log2 | Fold Change |>1,P<0.05),其中与正常组织相比较,CRC组织中上调的有2个,下调的有19个.miR-3917在CRC组织中的表达显著下降(P<0.05).与CCD841 CoN细胞系相比,HCT 116细胞中miR-3917的表达显著降低(P<0.05).在HCT 116细胞中转染miR-mimic可以显著上调miR-3917的表达(P<0.05).与对照组相比,miR-mimic组中HCT 116细胞的增殖(CCK-8实验,P<0.05;平板克隆形成实验,P

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