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目的 采用基因敲除技术构建了卡介苗embC基因缺失株.方法 从卡介苗基因组中扩增出embC基因,定向插入自杀质粒p2NIL中,切除embC基因中约1000 bp片段使其失活,再定向插入标记片段,筛选鉴定阳性克隆,电穿孔转入卡介苗,筛选重组菌株.结果 PCR和酶切鉴定证明构建成功用于基因打靶的置换型自杀质粒,并筛选成功获得重组卡介苗.结论 获得了卡介苗embC基因敲除株,为进一步研究对卡介苗免疫活性的影响奠定了基础.
作者：李娅莎；鲍朗；李岩；张会东；赵明才
来源：中国微生态学杂志 2009 年 21卷 5期
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