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目的 探讨细胞膜半通道蛋白Pannexin-1对肺损伤小鼠肺组织P2X7受体活化及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)介导的炎症反应的调控作用.方法 将60只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、机械通气(MV)组、MV+低剂量脂多糖(LPS)组(MLL组)、MV+中高剂量LPS组(MML组)和MV+高剂量LPS组(MHL组),每组12只.应用大潮气量MV联合气道内注射LPS的方法制备小鼠双重打击肺损伤模型.所有小鼠均行气管切开插管,Sham组小鼠保持自主呼吸,其余4组均给予?28?mL/kg大潮气量MV.小鼠呼吸稳定后,Sham组和MV组经气道内注入生理盐水(NS)8?mL/kg,MLL组、MML组及MHL组分别给予2、5、8?mg/kg的LPS(以NS稀释成8?mL/kg).MV?4?h后处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定细胞内外ATP浓度.取肺组织,测定肺含水率;苏木素-伊红(HE)染色后观察肺组织病理学改变,并进行肺损伤评分;采用免疫组化法观察肺组织中Pannexin-1的表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western?Blot)及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺组织中Pannexin-1、P2X7受体、caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白与mRNA表达.结果 Sham组小鼠肺组织无明显病理学改变;细胞内ATP浓度高于细胞外;肺组织含水率较低;免疫组化显示,肺组织中Pannexin-1呈低

作者:李娜;贾佳;吴兴茂;赵阳;臧彬

来源:中华危重病急救医学 2018 年 30卷 11期

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李娜;贾佳;吴兴茂;赵阳;臧彬
来源:
中华危重病急救医学 2018 年 30卷 11期
标签:
细胞膜半通道蛋白Pannexin-1 三磷酸腺苷 肺损伤 脂多糖 机械通气 Hemichannels protein Pannexin-1 Triphosadenine Lung injury Lipopolysaccharide Mechanical ventilation
目的 探讨细胞膜半通道蛋白Pannexin-1对肺损伤小鼠肺组织P2X7受体活化及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)介导的炎症反应的调控作用.方法 将60只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、机械通气(MV)组、MV+低剂量脂多糖(LPS)组(MLL组)、MV+中高剂量LPS组(MML组)和MV+高剂量LPS组(MHL组),每组12只.应用大潮气量MV联合气道内注射LPS的方法制备小鼠双重打击肺损伤模型.所有小鼠均行气管切开插管,Sham组小鼠保持自主呼吸,其余4组均给予?28?mL/kg大潮气量MV.小鼠呼吸稳定后,Sham组和MV组经气道内注入生理盐水(NS)8?mL/kg,MLL组、MML组及MHL组分别给予2、5、8?mg/kg的LPS(以NS稀释成8?mL/kg).MV?4?h后处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定细胞内外ATP浓度.取肺组织,测定肺含水率;苏木素-伊红(HE)染色后观察肺组织病理学改变,并进行肺损伤评分;采用免疫组化法观察肺组织中Pannexin-1的表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western?Blot)及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺组织中Pannexin-1、P2X7受体、caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白与mRNA表达.结果 Sham组小鼠肺组织无明显病理学改变;细胞内ATP浓度高于细胞外;肺组织含水率较低;免疫组化显示,肺组织中Pannexin-1呈低

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