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目的 基因克隆、表达、纯化结核分枝杆茵14KDa蛋白,研究其抗原性,评价其在血清学诊断中的价值.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增14KDa蛋白基因片断,将其插入到高效表达栽体PET-22b(+)上,构建重组质粒PET-22b(+)/14KDa,重组质粒在大肠杆菌中由IPTG诱导表达,表达产物经金属离子整合亲和层析方法纯化,免疫印迹和酶联免疫吸附(ELISA)试验分析重组蛋白的抗原性.结果 构建了具有正确基因序列的14KDa蛋白重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中以可溶性蛋白形式表达,重组蛋白的表达量占菌体蛋白的40.8
作者：周丽蓉；徐敬华；罗永艾；王国治
来源：中国现代医学杂志 2008 年 18卷 5期
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