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目的 探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导大鼠胰腺星形细胞(PSCs)活化及上皮间质转化(EMT)的作用.方法 组织块法分离、培养及鉴定大鼠PSCs后,10 ng/ml TGF-β2刺激PSCs 72 h,光镜下观察细胞形态学改变;免疫荧光染色及Western blot法检测α-SMA、Col-Ⅰ的蛋白表达;qRT-PCR及Westernblot法分别检测E-caderin、Vimentin基因及蛋白的表达;荧光显微镜观察E-caderin和Vimentin在细胞内的表达情况.结果 免疫荧光染色显示新分离PSCs神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、结蛋白(desmin)表达阳性,α-SMA表达阴性,符合其生物学特性.TGF-β2处理PSCs后,光镜下观察细胞体积及胞核变大,伪足发达,脂滴消失;免疫荧光染色及Western blot结果显示α-SMA和CoIⅠ表达量显著增加,呈典型活化状态;qRT-PCR、Western blot及免疫荧光染色结果显示Vimentin的表达明显高于空白对照组,而E-caderin的表达明显降低(P<0.05).结论 TGF-β 2可诱导PSCs活化及上皮间质转化.

作者:张尤历;李萍;王国英;赵义;王国乙;蔡菁;郭柔玉;刘鑫;徐岷

来源:中国现代医学杂志 2015 年 25卷 7期

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作者:
张尤历;李萍;王国英;赵义;王国乙;蔡菁;郭柔玉;刘鑫;徐岷
来源:
中国现代医学杂志 2015 年 25卷 7期
标签:
转化生长因子-β2 胰腺星形细胞 活化 上皮间质转化 transforming growth factor-β2 pancreatic stellate cells activation epithelial-mesenchymal transition
目的 探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导大鼠胰腺星形细胞(PSCs)活化及上皮间质转化(EMT)的作用.方法 组织块法分离、培养及鉴定大鼠PSCs后,10 ng/ml TGF-β2刺激PSCs 72 h,光镜下观察细胞形态学改变;免疫荧光染色及Western blot法检测α-SMA、Col-Ⅰ的蛋白表达;qRT-PCR及Westernblot法分别检测E-caderin、Vimentin基因及蛋白的表达;荧光显微镜观察E-caderin和Vimentin在细胞内的表达情况.结果 免疫荧光染色显示新分离PSCs神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、结蛋白(desmin)表达阳性,α-SMA表达阴性,符合其生物学特性.TGF-β2处理PSCs后,光镜下观察细胞体积及胞核变大,伪足发达,脂滴消失;免疫荧光染色及Western blot结果显示α-SMA和CoIⅠ表达量显著增加,呈典型活化状态;qRT-PCR、Western blot及免疫荧光染色结果显示Vimentin的表达明显高于空白对照组,而E-caderin的表达明显降低(P<0.05).结论 TGF-β 2可诱导PSCs活化及上皮间质转化.

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