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目的:应用重组腺病毒载体介导的rAd-OPG及rAd-OPG-shRNA基因转染人血管平滑肌细胞(HVSMC),探讨OPG基因与血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡之间的关系。方法通过制备OPG过表达及OPG RNA干扰腺病毒,转染体外培养的VSMC。将VSMC分为空白组,OPG过表达组,OPG过表达+RNA干扰组。应用RT-PCR及Western-blot检测各组OPG基因的表达变化。通过Hoechst 33258染色和流式细胞术(FACS)检测HVSMC细胞凋亡情况,并分析OPG基因表达对VSMC凋亡的影响。结果 OPG过表达组中,OPG基因表达量明显上升,HVSMC细胞凋亡率也随之升高;OPG-shRNA能明显抑制HVSMC中OPG基因的表达,在对OPG基因进行RNA干扰后,细胞凋亡率有一定程度的下降。结论 OPG的过表达可明显诱导HVSMC的凋亡。RNA干扰介导的OPG基因沉寂可在一定程度上抑制HVSMC的凋亡。

作者:何昊;舒畅

来源:中国血管外科杂志(电子版) 2013 年 4期

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作者:
何昊;舒畅
来源:
中国血管外科杂志(电子版) 2013 年 4期
标签:
OPG基因 RNA干扰 细胞凋亡 OPG gene RNA interference Apoptosis
目的:应用重组腺病毒载体介导的rAd-OPG及rAd-OPG-shRNA基因转染人血管平滑肌细胞(HVSMC),探讨OPG基因与血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡之间的关系。方法通过制备OPG过表达及OPG RNA干扰腺病毒,转染体外培养的VSMC。将VSMC分为空白组,OPG过表达组,OPG过表达+RNA干扰组。应用RT-PCR及Western-blot检测各组OPG基因的表达变化。通过Hoechst 33258染色和流式细胞术(FACS)检测HVSMC细胞凋亡情况,并分析OPG基因表达对VSMC凋亡的影响。结果 OPG过表达组中,OPG基因表达量明显上升,HVSMC细胞凋亡率也随之升高;OPG-shRNA能明显抑制HVSMC中OPG基因的表达,在对OPG基因进行RNA干扰后,细胞凋亡率有一定程度的下降。结论 OPG的过表达可明显诱导HVSMC的凋亡。RNA干扰介导的OPG基因沉寂可在一定程度上抑制HVSMC的凋亡。

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