目的:研究靶向大鼠基质金属蛋白酶-3基因的小干扰核糖核酸(siRNA)对血管平滑肌细胞增殖的影响。
<br> 方法:构建靶向自发性高血压大鼠基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的三对核糖核酸(RNA)干扰序列。将体外培养的血管平滑肌细胞随机分为对照组、Lipofectamine 2000(转染试剂)组、MMP-3-siRNA-1组、MMP-3-siRNA-2组、MMP-3-siRNA-3组,以Lipofectamine 2000分别转染血管平滑肌细胞,48 h后,以实时定量聚合酶链反应(PCR)检测血管平滑肌细胞MMP-3信使核糖核酸(mRNA)的表达水平,筛选干扰效率最高的siRNA作为实验对象。血管平滑肌细胞随机分为4组:对照组、血小板源生长因子(PDGF)组、Lipofectamine 2000+PDGF组及MMP-3-siRNA-1+PDGF组;用siRNA转染体外培养的血管平滑肌细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测血管平滑肌细胞增殖。
<br> 结果:实时定量PCR显示,三对互补干扰片段均有不同程度的干扰效果,与对照组比较,MMP-3-siRNA-1组、MMP-3-siRNA-2组和MMP-3-siRNA-3组的mRNA水平明显降低,分别降低了81
作者:黄捷;冯艳;韩凌;李艳;张晶晶;宋昆鹏;石海莉
来源:中国循环杂志 2015 年 2期