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目的 研究与肝纤维化相关miRNA(miR)在日本血吸虫可溶性虫卵抗原刺激小鼠肝细胞(AML12)后的表达情况,为阐明血吸虫感染导致肝纤维化的机制奠定基础.方法 使用日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Soluble egg antigens,SEA)刺激AML12后,采用定量PCR检测AML12中的miR-122、miR-182、miR-23b、miR-27b及KH型剪切调控蛋白(KH-type splicing regulatory protein,KSRP)的mRNA水平,以Western blotting检测KSRP蛋白的表达变化;分别用anti-miR-27b、miR-27b precursor转染AML12后,以定量PCR和Western blotting检测AML12中KSRP的mRNA和蛋白水平.结果经SEA刺激后,AML12中miR-182、miR-23b及miR-27b mRNA水平下降(P均<0.05),而细胞中miR-122 mRNA与KSRP的mRNA水平及蛋白表达水平均上调(P均<0.05).此外,anti-miR-27b与miR-27b precursor转染组KSRP的mRNA水平均无明显变化,但anti-miR-27b组细胞中KSRP的蛋白表达增加,miR-27b precursor组KSRP的蛋白表达降低.结论SEA刺激AML12导致诸多与肝纤维化相关的miRNA及KSRP的表达发生变化,其中miR-27b可调控KSRP的表达,这为进一步研究血吸虫感染导致的肝纤维化的分子机制奠定了基础.

作者:王欢;卢雅静;高彦茹;王舒弘;周蕊;董惠芬

来源:中国血吸虫病防治杂志 2017 年 29卷 2期

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作者:
王欢;卢雅静;高彦茹;王舒弘;周蕊;董惠芬
来源:
中国血吸虫病防治杂志 2017 年 29卷 2期
标签:
日本血吸虫 肝纤维化 miRNA 可溶性虫卵抗原 肝细胞 Schistosoma japonicum Liver fibrosis miRNA Soluble egg antigen(SEA) Hepatocytes
目的 研究与肝纤维化相关miRNA(miR)在日本血吸虫可溶性虫卵抗原刺激小鼠肝细胞(AML12)后的表达情况,为阐明血吸虫感染导致肝纤维化的机制奠定基础.方法 使用日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Soluble egg antigens,SEA)刺激AML12后,采用定量PCR检测AML12中的miR-122、miR-182、miR-23b、miR-27b及KH型剪切调控蛋白(KH-type splicing regulatory protein,KSRP)的mRNA水平,以Western blotting检测KSRP蛋白的表达变化;分别用anti-miR-27b、miR-27b precursor转染AML12后,以定量PCR和Western blotting检测AML12中KSRP的mRNA和蛋白水平.结果经SEA刺激后,AML12中miR-182、miR-23b及miR-27b mRNA水平下降(P均<0.05),而细胞中miR-122 mRNA与KSRP的mRNA水平及蛋白表达水平均上调(P均<0.05).此外,anti-miR-27b与miR-27b precursor转染组KSRP的mRNA水平均无明显变化,但anti-miR-27b组细胞中KSRP的蛋白表达增加,miR-27b precursor组KSRP的蛋白表达降低.结论SEA刺激AML12导致诸多与肝纤维化相关的miRNA及KSRP的表达发生变化,其中miR-27b可调控KSRP的表达,这为进一步研究血吸虫感染导致的肝纤维化的分子机制奠定了基础.

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