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目的:探讨参附注射液(SFI)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)核转位的干预作用.方法:以经LPS诱导的小鼠单核巨嗜细胞RAW264.7为对象,以组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP966为阳性对照,在CCK-8法筛选给药剂量的基础上,采用免疫荧光法观察低、中、高剂量(3、6、12μL/mL)SFI对细胞中HMGB1核转位的影响,采用实时荧光聚合酶链式反应法检测细胞中HMGB1 mRNA的表达情况;采用Western blotting法检测细胞中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)的表达情况,并比较细胞胞核、胞浆中HMGB1的表达情况;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中HMGB1、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果:在空白对照组中,HMGB1主要定位于细胞核;经LPS诱导后,HMGB1由细胞核向胞浆迁移.与空白对照组比较,LPS组细胞中HMGB1 mRNA及其蛋白、TLR4的蛋白表达量以及上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α水平均显著升高(P<0.01);细胞胞核中HMGB1的蛋白表达量显著降低,而胞浆中HMGB1的蛋白表达量显著升高(P<0.01).经SFI作用后,各给药组细胞HMGB1的核移位及分泌均受到不同程度的抑制;与LPS组比较,各给药组细胞中HMGB1 mRNA及其蛋白的表达量,阳性对照组和SFI中、高剂量组细胞中TLR4的蛋白表达量以及各给药组细胞上清液中HMGB1、I

作者:艾飞;刘霞;黎晖;褚春薇;陈向云;郭俊峰;杨毅;梅丽艳;苗纪飞;温泉;叶森

来源:中国药房 2020 年 31卷 21期

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作者:
艾飞;刘霞;黎晖;褚春薇;陈向云;郭俊峰;杨毅;梅丽艳;苗纪飞;温泉;叶森
来源:
中国药房 2020 年 31卷 21期
标签:
参附注射液 RAW264.7细胞 高迁移率族蛋白B1 炎症因子 核转位
目的:探讨参附注射液(SFI)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)核转位的干预作用.方法:以经LPS诱导的小鼠单核巨嗜细胞RAW264.7为对象,以组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP966为阳性对照,在CCK-8法筛选给药剂量的基础上,采用免疫荧光法观察低、中、高剂量(3、6、12μL/mL)SFI对细胞中HMGB1核转位的影响,采用实时荧光聚合酶链式反应法检测细胞中HMGB1 mRNA的表达情况;采用Western blotting法检测细胞中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)的表达情况,并比较细胞胞核、胞浆中HMGB1的表达情况;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中HMGB1、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果:在空白对照组中,HMGB1主要定位于细胞核;经LPS诱导后,HMGB1由细胞核向胞浆迁移.与空白对照组比较,LPS组细胞中HMGB1 mRNA及其蛋白、TLR4的蛋白表达量以及上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α水平均显著升高(P<0.01);细胞胞核中HMGB1的蛋白表达量显著降低,而胞浆中HMGB1的蛋白表达量显著升高(P<0.01).经SFI作用后,各给药组细胞HMGB1的核移位及分泌均受到不同程度的抑制;与LPS组比较,各给药组细胞中HMGB1 mRNA及其蛋白的表达量,阳性对照组和SFI中、高剂量组细胞中TLR4的蛋白表达量以及各给药组细胞上清液中HMGB1、I

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