目的 探究雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)下调导致的小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤是否与自噬相关.方法 不同浓度ERα抑制剂ICI182780(ICI)处理TM4细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性;将细胞分为正常对照组、不同浓度ICI处理组.光镜观察细胞数量及形态变化;Western blot法检测ERα蛋白、连接功能相关蛋白、自噬标志物蛋白表达变化;免疫荧光法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)表达与定位;氯喹(chloroquine,CQ)与ICI联合作用细胞24 h,Western blot法检测自噬及连接功能相关蛋白表达水平.结果 ICI50 nmol·L-1及以上浓度时,细胞活力明显下降;光镜观察ICI组细胞空泡增多;与正常对照组相比,ICI用药组ERα、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)、紧密连接蛋白 11(claudin-11)、β-联蛋白(β-cate-nin)及Cx43表达水平均下降,而神经钙黏蛋白(N-cadher-in)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达无明显变化;微管相关蛋白轻链3(LC3)上升,p62表达下降;免疫荧光结果显示,ICI用药组Cx43荧光表达量明显下降,位置无明显变化;与ICI 组相比,CQ+ICI 组 LC3 Ⅱ、p62、ZO-1、β-catenin、Cx43 表达水平均上升.结论 ERα下调可导致TM4细胞连接功能损伤,其机制可能与激活自噬有关.

作者：杨焱娜；张长城；常言语；周本文；陈思敏；邓何；赵海霞

来源：中国药理学通报 2023 年 39卷 9期