目的：观察过氧化氢（H2O2）诱导血管平滑肌细胞（VSMC）内质网应激及其自噬的作用机制。方法体外培养VSMC细胞，加入H2O250，100，200，400，600，800，1200和1600μmol·L-1分别作用12和24 h后，MTT法检测H2O2对VSMC的抑制率；倒置相差显微镜观察H2O2对VSMC细胞形态的影响；采用间接免疫荧光法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3（LC3）和泛素结合蛋白p62的表达，采用Western蛋白印迹法检测自噬相关蛋白人卷曲螺旋肌球蛋白样BCL2相互作用蛋白/自噬基因（Beclin-1）和LC3、内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和CCAAT-增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）及自噬上游信号通路哺乳动物西罗莫司（雷帕霉素）靶蛋白（mTOR）的表达。结果 MTT结果显示，H2O250~1600μmol·L-1作用VSMC细胞12和24 h，VSMC细胞存活率明显降低，12和24 h的IC50分别为（597.2±2.3）和（447.4±1.7）μmol·L-1。倒置相差显微镜观察可见H2O2400μmol·L-1组VSMC收缩变圆。H2O2400μmol·L-1作用VSMC 12 h时，细胞存活率由（97.5±0.1）
作者：李松岩；郭敏；王烟；于洋；刘师兵；徐冶
来源：中国药理学与毒理学杂志 2015 年 6期
