目的 探讨重组人神经生长因子(rhNGF)的神经保护作用及其机制.方法 BV2小胶质细胞分为细胞对照组、脂多糖(LPS)组及LPS+rhNGF 50和500 μg·L-1组.除细胞对照组外,其余3组用LPS 1 mg·L-1刺激BV2细胞24h诱导BV2细胞炎症反应,随后LPS+rhNGF组加rhNGF继续孵育48 h.孵育结束后收集BV2细胞,并收集各组培养上清即条件培养基(MCM),各组BV2细胞和MCM分别与小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a(N2a)共培养12或24 h.CCK-8法检测BV2细胞存活率,实时荧光定量PCR检测BV2细胞中促炎因子白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β及抗炎因子IL-4和IL-10 mRNA表达水平,CBA法检测BV2细胞培养上清中IL-6,TNF-α,IL-4和IL-10浓度,免疫荧光法检测BV2细胞M1表型标志物CD16和M2表型标志物CD206表达,NeuN/TUNEL共染法和AnnexinⅤ/7-AAD法检测N2a细胞凋亡率.结果 与细胞对照组相比,LPS组BV2细胞存活率显著下降(P<0.01),细胞变圆且胞体变大;促炎因子IL-1β,IL-6和TNF-α及抗炎因子IL-10 mRNA水平显著升高(P<0.01),抗炎因子IL-4 mRNA水平下降(P<0.01);IL-6和TNF-α蛋白水平显著升高(P<0.01),IL-4蛋白水平无显著差异;CD16和CD206阳性细胞百分比明显升高(P<0.01),CD16阳性细胞升高更加明显;与BV2细胞或其MCM共培养的N2a细胞存活率显著
作者:李瑶;陈旖;朱丹妮;宋小红;张金龙;张哲;赵拯浩;侯利华;吴诗坡;陈薇
来源:中国药理学与毒理学杂志 2023 年 37卷 8期