您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览40 | 下载30

目的 探讨重组人神经生长因子(rhNGF)的神经保护作用及其机制.方法 BV2小胶质细胞分为细胞对照组、脂多糖(LPS)组及LPS+rhNGF 50和500 μg·L-1组.除细胞对照组外,其余3组用LPS 1 mg·L-1刺激BV2细胞24h诱导BV2细胞炎症反应,随后LPS+rhNGF组加rhNGF继续孵育48 h.孵育结束后收集BV2细胞,并收集各组培养上清即条件培养基(MCM),各组BV2细胞和MCM分别与小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a(N2a)共培养12或24 h.CCK-8法检测BV2细胞存活率,实时荧光定量PCR检测BV2细胞中促炎因子白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β及抗炎因子IL-4和IL-10 mRNA表达水平,CBA法检测BV2细胞培养上清中IL-6,TNF-α,IL-4和IL-10浓度,免疫荧光法检测BV2细胞M1表型标志物CD16和M2表型标志物CD206表达,NeuN/TUNEL共染法和AnnexinⅤ/7-AAD法检测N2a细胞凋亡率.结果 与细胞对照组相比,LPS组BV2细胞存活率显著下降(P<0.01),细胞变圆且胞体变大;促炎因子IL-1β,IL-6和TNF-α及抗炎因子IL-10 mRNA水平显著升高(P<0.01),抗炎因子IL-4 mRNA水平下降(P<0.01);IL-6和TNF-α蛋白水平显著升高(P<0.01),IL-4蛋白水平无显著差异;CD16和CD206阳性细胞百分比明显升高(P<0.01),CD16阳性细胞升高更加明显;与BV2细胞或其MCM共培养的N2a细胞存活率显著

作者:李瑶;陈旖;朱丹妮;宋小红;张金龙;张哲;赵拯浩;侯利华;吴诗坡;陈薇

来源:中国药理学与毒理学杂志 2023 年 37卷 8期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:40 | 下载:30
作者:
李瑶;陈旖;朱丹妮;宋小红;张金龙;张哲;赵拯浩;侯利华;吴诗坡;陈薇
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2023 年 37卷 8期
标签:
神经炎症 重组人神经生长因子 小胶质细胞 炎症反应 细胞凋亡 neuroinflammation recombinant human nerve growth factors microglia inflammation apoptosis
目的 探讨重组人神经生长因子(rhNGF)的神经保护作用及其机制.方法 BV2小胶质细胞分为细胞对照组、脂多糖(LPS)组及LPS+rhNGF 50和500 μg·L-1组.除细胞对照组外,其余3组用LPS 1 mg·L-1刺激BV2细胞24h诱导BV2细胞炎症反应,随后LPS+rhNGF组加rhNGF继续孵育48 h.孵育结束后收集BV2细胞,并收集各组培养上清即条件培养基(MCM),各组BV2细胞和MCM分别与小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a(N2a)共培养12或24 h.CCK-8法检测BV2细胞存活率,实时荧光定量PCR检测BV2细胞中促炎因子白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β及抗炎因子IL-4和IL-10 mRNA表达水平,CBA法检测BV2细胞培养上清中IL-6,TNF-α,IL-4和IL-10浓度,免疫荧光法检测BV2细胞M1表型标志物CD16和M2表型标志物CD206表达,NeuN/TUNEL共染法和AnnexinⅤ/7-AAD法检测N2a细胞凋亡率.结果 与细胞对照组相比,LPS组BV2细胞存活率显著下降(P<0.01),细胞变圆且胞体变大;促炎因子IL-1β,IL-6和TNF-α及抗炎因子IL-10 mRNA水平显著升高(P<0.01),抗炎因子IL-4 mRNA水平下降(P<0.01);IL-6和TNF-α蛋白水平显著升高(P<0.01),IL-4蛋白水平无显著差异;CD16和CD206阳性细胞百分比明显升高(P<0.01),CD16阳性细胞升高更加明显;与BV2细胞或其MCM共培养的N2a细胞存活率显著

Baidu
map