目的:检测miR-4698在肝癌组织及细胞系中的相对表达,分析其对肝癌细胞增殖和迁移的影响及分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织和肝癌细胞系中miR-4698的相对表达。在表达最低的肝癌细胞系中,采用脂质体转染法分别转染miR-4698模拟物和对照模拟物,命名为实验组和对照组。qRT-PCR检测转染效率。细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测过表达miR-4698对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-4698与靶基因的结合。qRT-PCR和Western blot分别检测靶基因在mRNA水平和蛋白水平的相对表达。结果:与癌旁组织相比,miR-4698在肝癌组织的表达明显降低(
P<0.01)。与正常肝细胞系相比,miR-4698在肝癌细胞系的表达明显降低(
P<0.05),在Huh7细胞的表达最低(
P<0.01)。转染后,与对照组相比,实验组Huh7细胞中miR-4698的表达明显增加(
P<0.01)。过表达miR-4698可抑制肝癌Huh7细胞的增殖能力(
P<0.05)和迁移能力(
P<0.05)。生物信息学显示miR-4698的靶基因是多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4),双荧光素酶报告基因证实miR-4698可互补结合GALNT4(
P<0.01)。qRT-PCR结果显示,过
作者:江忍;张茂娜;张弘;江悦;张军
来源:中国医师杂志 2021 年 23卷 4期