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目的 探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375 与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响.方法 建立A375 细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0 μg/L).采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白 1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P<0.01);与对照组比较,各剂量组G0/G1 期细胞比例均显著降低,S期和G2/M期细胞比例均显著升高(P<0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P<0.05 或P<0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA表达水平及SCF,c-Kit,MITF,TRP-1,TRP-2 的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05 或P<0.01).结论 紫铆花素可能通过调节SCF,c-Kit,MITF的表达而影响A375 细胞与HaCaT细胞共培养细胞的增殖、细胞周期和线粒体膜电位等细胞生物学活性.

作者:高莉;谭雪;罗静莺;闫明

来源:中国药业 2024 年 33卷 6期

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作者:
高莉;谭雪;罗静莺;闫明
来源:
中国药业 2024 年 33卷 6期
标签:
紫铆花素 人黑色素瘤细胞A375 人永生化角质形成细胞HaCaT 细胞周期 线粒体膜电位 干细胞因子 干细胞因子受体 小眼畸形相关转录因子 butein human melanoma cells A375 human immortalized keratinocytes HaCaT cell cycle mitochondrial membrane potential stem cell factor receptor of stem cell factor microphthalmia-associated transcription factor
目的 探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375 与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响.方法 建立A375 细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0 μg/L).采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白 1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P<0.01);与对照组比较,各剂量组G0/G1 期细胞比例均显著降低,S期和G2/M期细胞比例均显著升高(P<0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P<0.05 或P<0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA表达水平及SCF,c-Kit,MITF,TRP-1,TRP-2 的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05 或P<0.01).结论 紫铆花素可能通过调节SCF,c-Kit,MITF的表达而影响A375 细胞与HaCaT细胞共培养细胞的增殖、细胞周期和线粒体膜电位等细胞生物学活性.

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