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目的:观察MCF-7细胞低表达半胱氨酰白三烯Ⅱ型受体(CysLT2R)对半胱氨酰白三烯(LTC4)介导的细胞生长、侵袭能力、细胞周期和凋亡等生物学行为的影响.方法:针对CysLT2R的已知cDNA序列,设计并体外转录合成4条特异性shRNA,用脂质体介导转染入MCF-7细胞48 h,同时设阴性对照组(1条非特异性序列转染)、正常MCF-7对照组(未转染).Western blot检测干扰后CysLT2R蛋白表达水平下调的变化.应用噻唑蓝比色(MTT)法检测50 nM LTC4作用下细胞株生长能力;应用流式细胞仪检测50 nM LTC4作用下细胞周期和凋亡变化;应用趋化小室检测50 nM LTC4作用下MCF-7细胞侵袭运动活性.结果:与正常MCF-7细胞和阴性对照组比较,MCF-7细胞CysLT2R低表达组的细胞生长增殖无明显变化(P>0.05),干扰后,MCF-7细胞表现出侵袭活性明显增强(P<0.05),细胞周期和凋亡无明显变化.结论:CysLT2R在人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭过程中起着一定的作用,CysLT2R有可能是一种新的乳腺肿瘤抑制基因.

作者:韩芸蔚;孔鹏洲;冯玉梅;王欣

来源:中国肿瘤临床 2013 年 9期

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作者:
韩芸蔚;孔鹏洲;冯玉梅;王欣
来源:
中国肿瘤临床 2013 年 9期
标签:
乳腺肿瘤 细胞生物学 RNA干扰 breast carcinoma cell biology RNA interference
目的:观察MCF-7细胞低表达半胱氨酰白三烯Ⅱ型受体(CysLT2R)对半胱氨酰白三烯(LTC4)介导的细胞生长、侵袭能力、细胞周期和凋亡等生物学行为的影响.方法:针对CysLT2R的已知cDNA序列,设计并体外转录合成4条特异性shRNA,用脂质体介导转染入MCF-7细胞48 h,同时设阴性对照组(1条非特异性序列转染)、正常MCF-7对照组(未转染).Western blot检测干扰后CysLT2R蛋白表达水平下调的变化.应用噻唑蓝比色(MTT)法检测50 nM LTC4作用下细胞株生长能力;应用流式细胞仪检测50 nM LTC4作用下细胞周期和凋亡变化;应用趋化小室检测50 nM LTC4作用下MCF-7细胞侵袭运动活性.结果:与正常MCF-7细胞和阴性对照组比较,MCF-7细胞CysLT2R低表达组的细胞生长增殖无明显变化(P>0.05),干扰后,MCF-7细胞表现出侵袭活性明显增强(P<0.05),细胞周期和凋亡无明显变化.结论:CysLT2R在人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭过程中起着一定的作用,CysLT2R有可能是一种新的乳腺肿瘤抑制基因.

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