目的:骨肉瘤干细胞具有化疗耐药性.本文拟探讨耐阿霉素细胞干细胞样特性的改变,以及Notch通路在其中的调控作用.方法:采用2μM的阿霉素处理骨肉瘤细胞143B 24 h,去药继续培养5 d,检测干细胞样特性的改变,包括形态学的改变、Stro-1+/CD117+双阳性细胞比例、干细胞相关基因表达、悬浮成球的能力、EMT特性.qPCR及Western blot检测Notch通路受体及靶基因表达情况.利用Notch抑制剂DAPT预处理,检测其对耐阿霉素骨肉瘤细胞的干细胞样特性的影响.构建裸鼠移植瘤模型,检测Notch抑制剂对体内成瘤的影响.结果:耐阿霉素骨肉瘤细胞中Stro-1+/CD117+比例增高,干细胞相关基因Oct4、Sox2表达量增加,悬浮成球能力增强,EMT特性上调.qPCR及Western blot结果显示阿霉素耐药的骨肉瘤细胞中Notch受体胞内段NICD1及靶基因Hes1、Hey1等表达量上调.Notch信号抑制剂能够增强骨肉瘤对阿霉素的化疗敏感性,抑制体外阿霉素对骨肉瘤干细胞的富集作用.动物实验表明,Notch抑制剂DAPT能够抑制体内成瘤.结论:阿霉素能够富集骨肉瘤干细胞,Notch信号通路参与其中调控机制,抑制Notch通路能够靶向杀伤骨肉瘤细胞,增加化疗药物敏感性.
作者：余铃；高天；张政佩；陶春杰；郭卫春；方志伟；樊征夫
来源：中国肿瘤临床 2017 年 44卷 11期
