目的:探讨14-3-3σ与TPD52L1在低剂量中波紫外线( UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡、增殖和细胞周期中的作用。方法①取对数生长期HaCaT细胞,予低剂量UVB(累计照射剂量为2.97×10-2 J/cm2)照射后培养6~48 h收获细胞,另设不予UVB照射(予假照射)的对照,采用流式细胞分析法检测细胞凋亡率;将HaCaT细胞分为对照组和UVB组,于相应照射处理后0~72 h收获细胞,采用噻唑蓝法检测细胞增殖能力。②取HaCaT细胞随机分为对照组(予假照射)和UVB组,于相应照射处理后0~24 h收获细胞,采用流式细胞术检测G2/M期细胞比例。③予低剂量UVB照射HaCaT细胞后培养3~24 h或3~30 h,收获细胞,另设予假照射的对照,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测细胞中14-3-3σ与 TPD52 L1的 mRNA 的相对表达水平,采用蛋白质印迹法检测细胞中14-3-3σ与TPD52L1的蛋白相对水平表达。结果①UVB照射后24 h, HaCaT 细胞凋亡率上升至最高值( P<0.05),增殖能力下降至最低值(P<0.05)。②对照组HaCaT细胞G2/M期比例呈现在假照射后6~12 h维持在最高值,至假照射后18 h下降至最低值的周期性改变特征;UVB组HaCaT细胞G2/M期比例在照射后6、12和18 h均较对照组上升(P<0.05),并持续在最高值,发生较明显的G2/M期阻滞。③U
作者:郑莉;黄海波;王建宇;周美娟
来源:中国职业医学 2016 年 43卷 4期