目的 采用网络药理学方法分析顾步汤治疗糖尿病足溃疡(DFU)的可能作用靶点及相关机制,并进行细胞实验验证.方法 利用TCMSP数据库查找顾步汤主要有效成分及作用靶点,通过GeneCards、OMIM数据库收集与DFU相关基因,建立疾病-靶点-化学成分网络.通过GO和KEGG通路富集分析探讨顾步汤对DFU可能的作用途径.构建NIH/3T3细胞和RAW264.7细胞共培养体系,将细胞随机分为空白组、模型组、抑制剂组及顾步汤低、中、高剂量组,除空白组外,其余各组均以脂多糖诱导RAW264.7细胞构建巨噬细胞模型,采用白细胞介素-4(20 ng/mL)诱导建立巨噬细胞M2极化模型.采用流式细胞术检测NIH/3T3细胞凋亡率及M2型巨噬细胞数量,CCK-8法检测NIH/3T3细胞增殖率,划痕实验检测NIH/3T3细胞迁移率,Western blot检测Arg-1、FIZZ1及Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白表达,RT-PCR检测Arg-1、FIZZ1、Wnt4a、β-Catenin mRNA表达,免疫荧光染色检测Wnt4a和β-Catenin蛋白表达.结果 通过数据库检索获得顾步汤有效成分121个,主要成分对DFU的作用靶点共50个.KEGG通路富集分析得到顾步汤与DFU显著共关联的信号通路包括Wnt、PI3K-AKT、HIF-1信号通路等.细胞实验显示,顾步汤可显著降低NIH/3T3细胞凋亡率及M2型巨噬细胞数量,增加NIH/3T3细胞增殖率及迁移率,下调Ar

作者：王继雪；杨稀瑞；马海涛；代雪娜；王汉杰；袁星星；周涛

来源：中国中医药信息杂志 2023 年 30卷 12期