根据国家主管部门对新型冠状病毒肺炎中医病证的分类,确定在寒湿证小鼠模型基础上感染人冠状病毒229E(HCoV-229E),形成人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证病证结合模型,该模型可模拟《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)》中医治疗普通型病证.具体步骤如下:建立寒湿证小鼠模型,在此模型基础上感染HCoV-229E,实验分为正常对照组,感染对照组,寒湿对照组,寒湿感染组(模型组),柴银颗粒高(8.8 g·kg-1·d-1)、低(4.4 g·kg-1·d-1)剂量组.感染当天给予柴银颗粒治疗,连续给药3d.末次给药第2天解剖取肺组织,计算肺指数及抑制率;提取肺组织核酸,实时荧光定量RT-PCR法检测病毒载量;分离血液白细胞,流式细胞术检测T和B淋巴细胞百分比;提取肺组织蛋白,ELISA法检测IL-6,IL-10,TNF-α及IFN-γ含量.体外实验采用细胞病变(CPE)抑制法,从药物的最大无毒浓度开始,测定柴银颗粒对HCoV-229E的抑制作用,按Reed-muench法计算50％细胞毒性浓度(TC50)、最大无毒浓度(TC0)、50％细胞抑制浓度(IC50)及药物治疗指数(TI).结果 显示,柴银颗粒高、低剂量能显著降低人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证小鼠的肺指数(P＜0.01),抑制率分别为61.02％,55.45％;显著升高人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证小鼠外周血CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、总B淋巴细胞百分比(P
作者：鲍岩岩；时宇静；郭姗姗；耿子涵；高英杰；包蕾；赵荣华；孙静；张贵民；关永霞；崔晓兰
来源：中国中药杂志 2020 年 45卷 13期
