旨在优选体外诱导中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成的条件,以建立相对稳定的实验技术平台.通过比较不同条件,包括大鼠和小鼠等常用的实验动物,利用percoll密度梯度离心法分离骨髓中性粒细胞、外周血中性粒细胞等多种细胞来源,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)不同诱导剂体外诱导,通过MPO/CitH3/DAPI免疫荧光标记法以及细胞培养上清游离DNA(cell free DNA,cfDNA)含量检测综合评价,筛选体外诱导NETs形成的优选条件;在上述平台选择基础上,进一步通过给予中药有效单体川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)进行验证,综合评估优选的体外NETs诱导条件的稳定性.结果显示,包被多聚赖氨酸可一定程度促进小鼠骨髓中性粒细胞NETs形成.LPS和PMA均可显著促进小鼠骨髓中性粒细胞MPO、CitH3 蛋白表达,并提高大鼠外周血中性粒细胞培养上清中cfDNA含量;且与LPS相比,PMA诱导cfDNA水平升高更显著(P<0.05).与PMA共孵育后小鼠骨髓中性粒细胞、大鼠骨髓中性粒细胞和大鼠外周血中性粒细胞中MPO、CitH3 蛋白表达均显著升高,以大鼠外周血中性粒细胞升高最明显.TMP可以显著下调PMA诱导的大鼠外周血中性粒细胞中MPO、CitH3 和NE

作者：戚明珠；李卓航；黄荷兰；祝盼盼；朱鏐娈；林娜；苏晓慧；孔祥英

来源：中国中药杂志 2024 年 49卷 9期