目的 探讨LASS2/TMSG1基因沉默对人前列腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响及其分子作用机制.方法 建立稳定表达LASS2/TMSG1-shRNA的低转移潜能人前列腺癌PC-3M-2B4细胞系,然后采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)掺入实验、软琼脂集落形成实验、流式细胞术、Matrigel穿膜侵袭实验和裸鼠体内成瘤实验研究LASS2/TMSG1的细胞生物学功能;采用Western blot法、明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2和9(MMP-2和MMP-9)的表达、分泌及活性;并采用V-ATPase活性检测试剂盒检测细胞内V-ATPase活性,以及采用BCECF H+敏感荧光探针检测细胞外H+浓度以研究LASS2/TMSG1抑制前列腺癌转移的分子作用机制.结果 转染LASS2/TMSG1-shRNA后,PC-3M-2B4细胞的增殖能力、锚定不依赖生长能力及体外侵袭能力明显提高(P＜0.05),而细胞凋亡率明显下降(P＜0.01),但对细胞周期无影响(P＞0.05);LASS2/TMSG1基因沉默组移植瘤的体积、质量及淋巴结转移率(5/6)和核增殖指数(0.53±0.05)明显大于空白对照组(0/6,0.13 ±0.02)和无关阴性对照组(1/6,0.10 ±0.03;P＜0.05);LASS2/TMSG1基因沉默组的V-ATPase酶活性(P＜0.01)及细胞外H+浓度明显升高(P＜0.01),而MMP-2及MMP-9的表达量和分泌量无明显变化(P＞0.05),但分泌的MMP-2和MMP-9活性增加(P＜0.05).结论 特异性

作者：徐晓艳；由江峰；裴斐

来源：中华病理学杂志 2014 年 43卷 3期