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目的建立植物中表达乙型肝炎表面抗原(HbsAg)的体系和方法,为研究植物乙型肝炎疫苗打下基础.方法将HBsAg基因转入带有植物特异启动子及潮霉素筛选标记的双元载体pCAMBIA1301中,并将重组的载体转入农杆菌LBA4404,再通过农杆菌浸染的方法转化烟草.对筛选所得的转化株进行鉴定.结果转化株叶片进行β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色呈蓝色,表明靶基因被转入烟草并表达.应用HBsAg特异引物从转化株烟草的基因组中扩增出678 bp的条带.同时转化株叶片的粗提蛋白经酶联免疫吸附试验(ELISA)显示阳性结果,Western blot显示24 000附近有明显条带.结论烟草能够成功地表达乙型肝炎表面抗原.

作者:李缨;张清波;邬祥惠

来源:中华传染病杂志 2001 年 19卷 5期

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作者:
李缨;张清波;邬祥惠
来源:
中华传染病杂志 2001 年 19卷 5期
标签:
肝炎表面抗原,乙型 疫苗 植物,转基因
目的建立植物中表达乙型肝炎表面抗原(HbsAg)的体系和方法,为研究植物乙型肝炎疫苗打下基础.方法将HBsAg基因转入带有植物特异启动子及潮霉素筛选标记的双元载体pCAMBIA1301中,并将重组的载体转入农杆菌LBA4404,再通过农杆菌浸染的方法转化烟草.对筛选所得的转化株进行鉴定.结果转化株叶片进行β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色呈蓝色,表明靶基因被转入烟草并表达.应用HBsAg特异引物从转化株烟草的基因组中扩增出678 bp的条带.同时转化株叶片的粗提蛋白经酶联免疫吸附试验(ELISA)显示阳性结果,Western blot显示24 000附近有明显条带.结论烟草能够成功地表达乙型肝炎表面抗原.

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