目的:构建微流控器官芯片，并评估其在模拟骨关节炎进程中软骨下骨骨重塑的能力。方法:基于微流控技术和细胞共培养技术设计芯片主体，MC3T3-E1细胞贴壁培养在细胞接种小室的内部，在细胞接种小室的底部以0.5 ml/min的流速灌流培养基。评价指标：（1）微流控器官芯片的评价：灌流生长培养基，采用模拟仿真实验测试不同时间点细胞接种小室内部和底部液体的浓度差和平衡时间；活死染色观察细胞在设定流速下连续培养3、7 d的生物相容性，分为3 d组和7 d组。（2）微流控器官芯片的促成骨作用：灌流成骨诱导培养基，通过碱性磷酸酶（ALP）染色和PCR比较细胞在静态和灌流条件下3、7 d的黑色ALP阳性细胞数量和成骨相关标志基因成骨特异性转录因子2（RUNX2）、Ⅰ型胶原（COL1A1）、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、骨钙素（OCN）的表达情况，分为静态未诱导组、静态诱导组和灌流诱导组。（3）三种成骨细胞亚型外泌体（EVs）的形态和大小表征及生物相容性：获取三种不同细胞亚型［内皮型成骨细胞（EnOB）-EVs、基质型成骨细胞（StOB）-EVs和矿化型成骨细胞（MinOB）-EVs］，通过透射电镜和粒径分析获取形态和大小；灌流含有三种不同细胞亚型EVs的生长培养基，通过细胞增殖/凋亡检测实验比较添加不同EVs浓度（1、1.25、
作者：沈芙茗；廖玲妮；王文君；李冀龙；张浩；胡衍；徐可；苏佳灿
来源：中华创伤杂志 2024 年 40卷 2期
