目的:探讨二甲双胍对不同分化程度的子宫内膜癌细胞增殖的影响及相关作用机制。方法选取高分化子宫内膜癌细胞系Ishikawa和低分化子宫内膜癌细胞系AN3CA细胞。(1)活细胞计数(CCK-8)法检测二甲双胍和表皮生长因子受体(EGFR)信号通路抑制剂——AG1478作用后Ishikawa和AN3CA细胞增殖能力的变化,实验分为3组,二甲双胍组:加入不同浓度(分别为0.01、0.1、1、5、10 mmol/L,为终浓度,下同)的二甲双胍100μl;AG1478组:加入不同浓度(分别为1、5、10、15μmol/L)的AG1478100μl;二甲双胍+AG1478组:加入不同浓度(分别为0.1、1、5 mmol/L)的二甲双胍和不同浓度(分别为1、5、10μmol/L)的AG1478100μl。各组细胞继续培养24、48、72 h后检测其增殖能力的变化。(2)逆转录(RT)-PCR技术检测不同浓度(分别为0.01、0.1、1、5、10 mmol/L)二甲双胍作用24 h后Ishikawa和AN3CA细胞中EGFR mRNA表达水平的变化。(3)蛋白印迹(western blot)法检测二甲双胍(1 mmol/L)作用不同时间(分别为2、4、6、8 h)后Ishikawa和AN3CA细胞中总EGFR、磷酸化EGFR(p-EGFR)和总细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平的变化。结果(1)CCK-8法检测显示,不同浓度的药物作用不
作者:王静璐;史惠蓉;谢娅;彭铮
来源:中华妇产科杂志 2015 年 9期