目的 探讨Bcl-2结合抗凋亡基因3(BAG3)在子宫颈癌组织和细胞中的表达以及对子宫颈癌上皮间质转化(EMT)的作用及其机制.方法 (1)收集2015年9月至2017年3月山东大学齐鲁医院和附属省立医院病理科保存的子宫颈癌标本50份,以2015年8月至2017年3月德州市立医院妇科收治的因子宫肌瘤行子宫全切除术或行子宫颈活检患者的正常子宫颈组织50份作为对照,分别采用逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹(western blot)法检测BAG3 mRNA和蛋白的表达并分析其临床意义.(2)选择子宫颈癌细胞系HeLa和SiHa细胞,以正常子宫颈上皮细胞为对照,分别采用RT-PCR技术和western blot法检测细胞中BAG3 mRNA和蛋白的表达;以下实验分为两组,即转染组[转染BAG3基因的小分子干扰RNA(si-BAG3)]和对照组[转染对照小分子干扰RNA(siRNA)],采用活细胞计数(CCK-8)法检测转染后两组HeLa和SiHa细胞的增殖情况[以吸光度(A)值表示];体外划痕实验和transwell小室实验检测转染后两组HeLa和SiHa细胞的迁移、侵袭能力(分别以愈合率和穿膜细胞数表示);建立两组子宫颈癌HeLa和SiHa细胞的裸鼠移植瘤模型,观察BAG3对移植瘤成瘤的影响,并采用western blot法检测移植瘤组织中EMT相关生物标志物[包括锌指转录因子(Slug)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、神经型钙黏蛋白(N-cadh
作者:魏莉;秦晓鹏;赵兴波;王伟
来源:中华妇产科杂志 2017 年 52卷 8期