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目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)的衰老与细胞内活性氧(ROS)水平的相关性.方法 采用密度梯度离心和贴壁分离法分离培养8例SLE患者及8名健康者BMSCs;免疫荧光法检测细胞核大小;通过检测衰老相关β-半乳糖苷酶(SA β-gal)活性观察BMSCs体外培养过程中的衰老现象;流式细胞术检测BMSCs细胞内活性氧ROS表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测基因PI3K、NRas、KRas和FoxO3的表达水平;Western blot法检测FoxO3、磷酸化-FoxO3、AKT和磷酸化-AKT的表达水平;采用t检验或Mann-Whitney秩和检验.结果 ①在体外培养过程中,SLE患者和健康人BMSCs的形态和细胞核大小差异无统计学意义[(31±4)与(28±5)μm,P=0.628];②SLE患者BMSCs SA β-gal活性显著高于健康人[(31.8±9.0)

作者:孟德芳;刘蕾;汤郁;施冬艳;张继云;王丹丹;孙凌云

来源:中华风湿病学杂志 2011 年 15卷 4期

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作者:
孟德芳;刘蕾;汤郁;施冬艳;张继云;王丹丹;孙凌云
来源:
中华风湿病学杂志 2011 年 15卷 4期
标签:
红斑狼疮,系统性 衰老 间质干细胞 活性氧 Lupus erythematosus,systemic Aging Mesenchymal stem cells Reactive oxygen species
目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)的衰老与细胞内活性氧(ROS)水平的相关性.方法 采用密度梯度离心和贴壁分离法分离培养8例SLE患者及8名健康者BMSCs;免疫荧光法检测细胞核大小;通过检测衰老相关β-半乳糖苷酶(SA β-gal)活性观察BMSCs体外培养过程中的衰老现象;流式细胞术检测BMSCs细胞内活性氧ROS表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测基因PI3K、NRas、KRas和FoxO3的表达水平;Western blot法检测FoxO3、磷酸化-FoxO3、AKT和磷酸化-AKT的表达水平;采用t检验或Mann-Whitney秩和检验.结果 ①在体外培养过程中,SLE患者和健康人BMSCs的形态和细胞核大小差异无统计学意义[(31±4)与(28±5)μm,P=0.628];②SLE患者BMSCs SA β-gal活性显著高于健康人[(31.8±9.0)

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