目的:研究分化前阶段不同浓度葡萄糖对滑膜间充质干细胞( SMSCs)成软骨能力的调节作用,并探究其分子调节机制。方法将分化前阶段SMSCs分组置于含有不同浓度葡萄糖的培养基中进行增殖培养:一组采用低浓度(1.0 g/L)葡萄糖培养SMSCs(LGMSMCs);另一组采用高浓度(4.5 g/L)葡萄糖培养SMSCs( HGMSMCs)。增殖培养7 d后,将两组SMSCs同时进行成软骨诱导分化,通过检测软骨标志基因的表达水平来评价两组SMSCs成软骨能力的大小;通过分析转化生长因子-β( TGF-β)和蛋白激酶-C( PKC)信号通路系统来研究其分子调节机制;设置平行实验,在高糖培养的SMSCs中加入PKC抑制剂G?6983进一步研究TGF-β和PKC信号通路系统。不同浓度的葡萄糖培养基中分化前DNA总量,分化前、分化阶段的SMCSs成软骨相关基因的表达比较采用成组t检验。结果 SMSCs培养第21天,HGMSMCs组的蛋白聚糖(AGN)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)及Ⅱ型胶原(ColⅡ)的表达明显少于LGMSMCs组的(t=-3.69,P<0.05;t=-77.57,P<0.01;t=-34.42, P<0.01);在SMSCs分化前阶段, GMSMCs 组的 TGF-βⅡ型受体( TGF β-RⅡ)的表达明显高于LGMSMCs组的(t=4.5,P<0.01);在SMSCs分化阶段,GMSMCs组的PKC磷酸化水平及TGF-βⅡ型受体(TGF
作者:谢金硕;陈松;邵加华;周义钦;符培亮;吴海山
来源:中华关节外科杂志(电子版) 2016 年 10卷 5期