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目的:探索逆转录病毒载体在基因治疗中的应用。 方法:用DNA重组技术构建HBV-S基因重组逆转录病毒载体,电穿孔转染PA317后,筛选高表达克隆,用假病毒颗粒感染HepG2、P815和EL4细胞,分别用RT-PCR及ELISA法检测目的基因表达。 结果:HBsAg在上述细胞中获得不同程度的表达,细胞上清液(48h)中HBsAg含量(吸光度值)分别为0.92、0.09和0.47。结论:逆转录病毒用载体,其目的基因在细胞内稳定表达,是一种高效的基因转移系统,适用于基因治疗实验。

作者:周智;张定凤;任红

来源:中华肝脏病杂志 2000 年 8卷 5期

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作者:
周智;张定凤;任红
来源:
中华肝脏病杂志 2000 年 8卷 5期
标签:
肝炎病毒,乙型 基因重组 真核表达 Hepatitis B virus Gene recombinant Eukaryotic expression
目的:探索逆转录病毒载体在基因治疗中的应用。 方法:用DNA重组技术构建HBV-S基因重组逆转录病毒载体,电穿孔转染PA317后,筛选高表达克隆,用假病毒颗粒感染HepG2、P815和EL4细胞,分别用RT-PCR及ELISA法检测目的基因表达。 结果:HBsAg在上述细胞中获得不同程度的表达,细胞上清液(48h)中HBsAg含量(吸光度值)分别为0.92、0.09和0.47。结论:逆转录病毒用载体,其目的基因在细胞内稳定表达,是一种高效的基因转移系统,适用于基因治疗实验。

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