目的 探讨HBV X基因对痉挛性截瘫蛋白(SPG)21表达的影响.方法 采用RT-PCR和Western blot检测HepG2和HepG2.2.15细胞mRNA和蛋白表达的差异,将带有SPG21基因启动子的报告质粒pGL3-SPG21分别与表达HBV基因组的单个基因的质粒共转染HepG2细胞,测定荧光色素酶的活性,以相对光单元(RUL)表达;RT-PCR和Western blot分别检测SPG21 mRNA和蛋白表达的变化.组间比较采用t检验.结果 HepG2.2.15细胞中SPG21 mRNA和蛋白的表达水平明显高于HepG2细胞,相对表达量(与β-肌动蛋白的灰度比值)为0.36±0.06对比0.21±0.05,P＜0.05.转染pCMV-S、pCMV-E、pCMV-C、pCMV-X、pCMV-P和pCMV-ag2B后的HepG2细胞中,荧光素酶的活性分别为每微克蛋白(86±12)RUL、(75±12)RUL、(69±11)RUL、(875±27)RUL、(104±16)RUL和(67±12)RUL;与转染pCMV-tag2B组细胞相比,转染X基因者荧光素酶活性明显升高(P＜0.01).HBV X基因在mRNA和蛋白水平上调SPG21的表达,这种激活作用随着X基因浓度的增加而增强.结论 HBV X基因能特异性地激活SPG21的表达.
作者：高国生；翁彭剑；纪礽斌；李德周；李永燕；李红山；丁世雄；胡静
来源：中华肝脏病杂志 2010 年 18卷 12期
