目的:研究硫辛酸对体外培养的H2 O2处理后的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响,并初步探讨硫辛酸促成骨细胞骨形成的作用机制。方法在体外培养的MC3T3-E1培养基中分别加入不同浓度(0.1、0.2和0.4 mmol/L)的硫辛酸作用20 h,接着加入1 mmol/L H2 O2作用4 h,用MTT法检测药物对成骨细胞活力的影响;用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP),细胞丙二醛(malondialdehyde, MDA),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD),乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)试剂盒检测成骨细胞内ALP、 SOD、 LDH活性和MDA含量;用Von Kossa染色法检测矿化结节数目;用real time-PCR方法检测成骨细胞内Ⅰ型胶原( collagen-Ⅰ, COL-Ⅰ)、骨钙素( osteocalcin, OCN)、转录因子Osterix、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2, BMP-2)、 NADPH氧化酶4(NADPH oxidase4, Nox4)、护骨素(osteoprotegerin, OPG)、细胞核因子κB受体活化因子配基( receptor activator nuclear factor-kappa B ligand, RANKL) mRNA表达,用流式细胞仪检测细胞内活性氧( reactive oxygen species, ROS)水平。结果硫辛酸可增加ALP活力和矿化结节数目,促进骨形成相关指标COL-Ⅰ
作者:付卓栋;付超;孙慧君;韩国柱;刘谟震
来源:中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2016 年 9卷 1期