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目的 利用基因工程方法重组表达神经突触结合蛋白Ⅰ的C2A片段,探讨其在心肌细胞凋亡显像中的应用价值.方法 (1)将C2A基因连接到含有谷胱甘肽转移酶(GST)的重组原核表达载体pGEX-6P-1上,转化感受态细菌BL21,异内基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后纯化.(2)用异硫氰酸荧光素(FITC)标记纯化的蛋白,通过细胞结合实验鉴定蛋白质活性.(3)采用2-亚氨基噻吩方法,进行99TcmO-4标记C2A-GST融合蛋白,标记后的蛋白质用纸层析法测定其放化纯.(4)制备大鼠心肌缺血-再灌注模型,通过尾静脉注射99Tcm-C2A-GST,1 h后用SPECT仪进行显像;显像结束后,处死大鼠,取出心肌,用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,分离缺血心肌和存活心肌,测质量及其放射性计数,比较缺血心肌与正常心肌每克组织百分注射剂量率(
作者：孙康云；周俊东；沈飞；方纬；吴锦昌
来源：中华核医学杂志 2010 年 30卷 5期
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