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目的:研究多重剪接RNA结合蛋白RBPMS在结肠炎相关结肠癌中的表达及对结肠癌细胞增殖的影响。方法:联合应用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关的结肠癌,得到结肠癌发生发展的4个不同阶段的小鼠模型(分别为炎症恢复期、轻度不典型增生、腺瘤、腺癌),同时设立无任何处理的对照组。对不同阶段的结肠组织进行RNA测序分析。采用Western blot法检测多种人类结肠癌细胞系中RBPMS的表达情况。使用LipofectamineTM 2 000将特异性小干扰RNA转染HCT116细胞,72 h后提取细胞总蛋白,并采用Western blot法检测敲降效率。采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测敲降RBPMS对细胞增殖的影响。采用克隆形成实验检测敲降RBPMS对肿瘤细胞克隆形成能力的影响。采用流式细胞术检测敲降RBPMS对细胞周期的影响。结果:AOM/DSS结肠炎相关结肠癌小鼠模型的结肠RNA测序结果显示,RBPMS mRNA的表达水平随着结肠癌的发生与发展逐步升高。进一步免疫组化染色结果显示,RBPMS在小鼠结肠炎相关结肠癌组织中高表达。体外实验证实敲降RBPMS显著抑制肿瘤细胞的增殖速度和克隆形成能力,造成细胞G0/G1阻滞,S期细胞比例显著降低。结论:RBPMS在结肠炎相关结肠癌癌组织中高表达,敲降RBPMS能够抑制HCT116细胞

作者:赵新华;马怡茗;贺龙梅;汪红英

来源:中华结直肠疾病电子杂志 2021 年 10卷 3期

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作者:
赵新华;马怡茗;贺龙梅;汪红英
来源:
中华结直肠疾病电子杂志 2021 年 10卷 3期
标签:
PBPMS 增殖 结肠炎相关结肠癌
目的:研究多重剪接RNA结合蛋白RBPMS在结肠炎相关结肠癌中的表达及对结肠癌细胞增殖的影响。方法:联合应用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关的结肠癌,得到结肠癌发生发展的4个不同阶段的小鼠模型(分别为炎症恢复期、轻度不典型增生、腺瘤、腺癌),同时设立无任何处理的对照组。对不同阶段的结肠组织进行RNA测序分析。采用Western blot法检测多种人类结肠癌细胞系中RBPMS的表达情况。使用LipofectamineTM 2 000将特异性小干扰RNA转染HCT116细胞,72 h后提取细胞总蛋白,并采用Western blot法检测敲降效率。采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测敲降RBPMS对细胞增殖的影响。采用克隆形成实验检测敲降RBPMS对肿瘤细胞克隆形成能力的影响。采用流式细胞术检测敲降RBPMS对细胞周期的影响。结果:AOM/DSS结肠炎相关结肠癌小鼠模型的结肠RNA测序结果显示,RBPMS mRNA的表达水平随着结肠癌的发生与发展逐步升高。进一步免疫组化染色结果显示,RBPMS在小鼠结肠炎相关结肠癌组织中高表达。体外实验证实敲降RBPMS显著抑制肿瘤细胞的增殖速度和克隆形成能力,造成细胞G0/G1阻滞,S期细胞比例显著降低。结论:RBPMS在结肠炎相关结肠癌癌组织中高表达,敲降RBPMS能够抑制HCT116细胞

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