目的：使用小干扰RNA(siRNA)干扰舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中营养缺乏自噬因子1(NAF1)的表达,观察对NAF1基因的沉默效果,并测定沉默后Tca8113细胞生长增殖侵袭能力的变化。方法建立小干扰RNA(si-NAF1)组、阴性对照(si-NC)组、对照(vector)组。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blotting法检测NAF1、细胞周期素D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达。 MTT实验检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell法观察各组细胞侵袭能力变化。结果与vector组相比,NAF1-siRNA干预Tca8113细胞后,si-NAF1组NAF1的mRNA和蛋白表达水平都明显降低(x2=25.65,t=-17.1,P<0.05),cyclin D1、MMP-2蛋白表达水平降低(tcyclin D1=-14.7,tMMP-2=-9.6,P<0.05),细胞增殖能力明显降低(t=-36.77,P<0.05),克隆形成能力明显减弱(t=-12.33,P<0.05),侵袭能力明显降低,si-NAF1组穿过Transwell膜的细胞少于vector组。结论通过siRNA技术降低NAF1表达可能通过降低cyclin D1水平抑制舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的增殖能力,通过影响MMP-2蛋白表达水平,抑制Tca8113细胞的侵袭能力。
作者：焦国华；阚智慧；高洪丽；张志光
来源：中华口腔医学研究杂志（电子版） 2014 年 6期
