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目的建立一种LAN探针实时荧光定量PCR检测血清/血浆中乙型肝炎病毒( HBV) DNA的方法。方法建立LAN探针实时荧光定量PCR准确定量检测HBV DNA的方法,以TaqMan探针法为对照,进行LNA针实时PCR的方法学评价。用LNA探针法和TaqMan探针法两种方法检测39例慢性乙型肝炎患者血清样品,对检测结果进行比较。结果相对于普通的TaqMan探针法,LAN探针实时荧光定量PCR检测HBV DNA具有更宽的检测范围、更高的灵敏度、稳定性、扩增效率和更低的探针浓度。在15例单纯HBsAg (+)标本中,有4例TaqMan探针实时PCR检测为HBV DNA为阴性,LNA探针法检测为阳性( P<0.05)。应用LNA探针法和TaqMan探针法检测35份HBV DNA阳性血清样本,结果表明LNA探针法和TaqMan探针法具有很好的可比性( r=0.9636,P<0.05)。结论 LNA探针实时PCR比TaqMan探针法有更高的灵敏度、稳定性、扩增效率和较低浓度的探针浓度,是一种更为可靠的检测HBV DNA的方法。

作者:边立忠;宋广辉;赵素芝;王清

来源:中华临床医师杂志(电子版) 2013 年 6期

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边立忠;宋广辉;赵素芝;王清
来源:
中华临床医师杂志(电子版) 2013 年 6期
标签:
人类B型肝炎病毒 实时PCR 探针 锁核酸 TaqMan探针 Human hepatitis B virus Real-time polymerase chain reaction Probe Locked nucleic acid TaqMan
目的建立一种LAN探针实时荧光定量PCR检测血清/血浆中乙型肝炎病毒( HBV) DNA的方法。方法建立LAN探针实时荧光定量PCR准确定量检测HBV DNA的方法,以TaqMan探针法为对照,进行LNA针实时PCR的方法学评价。用LNA探针法和TaqMan探针法两种方法检测39例慢性乙型肝炎患者血清样品,对检测结果进行比较。结果相对于普通的TaqMan探针法,LAN探针实时荧光定量PCR检测HBV DNA具有更宽的检测范围、更高的灵敏度、稳定性、扩增效率和更低的探针浓度。在15例单纯HBsAg (+)标本中,有4例TaqMan探针实时PCR检测为HBV DNA为阴性,LNA探针法检测为阳性( P<0.05)。应用LNA探针法和TaqMan探针法检测35份HBV DNA阳性血清样本,结果表明LNA探针法和TaqMan探针法具有很好的可比性( r=0.9636,P<0.05)。结论 LNA探针实时PCR比TaqMan探针法有更高的灵敏度、稳定性、扩增效率和较低浓度的探针浓度,是一种更为可靠的检测HBV DNA的方法。

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