目的:探讨自噬及内质网应激在卡非佐米(Carfilzomib)对MCF-7细胞凋亡的影响及作用机制。方法:体外培养MCF-7乳腺癌细胞,分为对照组及实验组,对照组进行传代培养,实验组卡非佐米(0.625、1.25、2.5、5、10、20、40、80、160、320?nmol/L)作用0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h,自噬抑制剂3-MA(0.5、1、5、10、20、40、80、160?nmol/L)作用48 h,内质网应激抑制剂Salubrinal(2.5、5、10、20、40、80、160、320 umol/L)作用48 h,采用MTT比色法检测卡非佐米、3-MA、Salubrinal对MCF-7细胞活力的影响.确定实验组的各药物浓度后,实验分为对照组,卡非佐米3-MA组,卡非佐米+Salubrinal组,流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测mRNA表达水平,Western blot法检测蛋白表达水平。结果:MTT检测结果显示卡非佐米随着浓度的升高和作用时间的延长细胞活性抑制作用增强,呈浓度依赖性与时间依赖性,当卡非佐米浓度为10?nmol/L作用48 h,抑制率为20.03±0.34**。3-MA,Salubrinal对MCF-7细胞增值抑制作用随着浓度增加作用增强。流式细胞检测结果提示与对照组相比,卡非佐米能够诱导MCF-7的凋亡,凋亡率为3.54
作者:包文华;塔拉
来源:中华临床医师杂志(电子版) 2023 年 17卷 11期