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目的 探讨miR-149在SiO2诱导的肺纤维化中对白细胞介素-6(IL-6)表达水平的调节作用.方法 (1)建立SiO2粉尘诱导的小鼠肺纤维化模型,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chainreaction,qRT-PCR)检测小鼠肺组织miR-149表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫组织化学法观察白细胞介素-6(IL-6)的蛋白表达情况.(2)应用具有肺泡Ⅱ型上皮细胞特性 的(A549)及支气管上皮细胞(HBE)构建SiO2粉尘刺激的呼吸系统上皮细胞模型,应用qRT-PCR检测miR-149水平,用Western blot法检测IL-6蛋白表达情况.(3)通过体外转染miR-149相似剂(mimics)及抑制剂(inhibitors)至A549细胞,Westem blot法检测细胞表达炎症因子IL-6蛋白的表达情况.(4)双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测煤工尘肺患者血清中IL-6蛋白的表达情况.结果 (1)在SiO2诱导的小鼠肺纤维化模型中,与空白对照组比较,SiO2处理后的3个时间点,小鼠肺组织miR-149表达明显下调,而IL-6蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01).(2)在粉尘刺激上皮细胞模型中,A549细胞及HBE细胞经SiO2刺激后,IL-6蛋白表达上调,miR-149表达量明显下调,差异有统计学意义(P<0.01).(3)对A549细胞转染miR-149相似物及抑制剂后实验结果显示,高表达miR-149后,A549细

作者:范晶晶;吉晓明;王莎莎;骆辰;吴白群;王婷;倪春辉

来源:中华劳动卫生职业病杂志 2014 年 32卷 3期

知识库介绍

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作者:
范晶晶;吉晓明;王莎莎;骆辰;吴白群;王婷;倪春辉
来源:
中华劳动卫生职业病杂志 2014 年 32卷 3期
标签:
miR-149 二氧化硅 白细胞介素6 肺纤维化 miR-149 Silicon dioxide Imterleukin-6 Pulmonary fibrosis
目的 探讨miR-149在SiO2诱导的肺纤维化中对白细胞介素-6(IL-6)表达水平的调节作用.方法 (1)建立SiO2粉尘诱导的小鼠肺纤维化模型,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chainreaction,qRT-PCR)检测小鼠肺组织miR-149表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫组织化学法观察白细胞介素-6(IL-6)的蛋白表达情况.(2)应用具有肺泡Ⅱ型上皮细胞特性 的(A549)及支气管上皮细胞(HBE)构建SiO2粉尘刺激的呼吸系统上皮细胞模型,应用qRT-PCR检测miR-149水平,用Western blot法检测IL-6蛋白表达情况.(3)通过体外转染miR-149相似剂(mimics)及抑制剂(inhibitors)至A549细胞,Westem blot法检测细胞表达炎症因子IL-6蛋白的表达情况.(4)双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测煤工尘肺患者血清中IL-6蛋白的表达情况.结果 (1)在SiO2诱导的小鼠肺纤维化模型中,与空白对照组比较,SiO2处理后的3个时间点,小鼠肺组织miR-149表达明显下调,而IL-6蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01).(2)在粉尘刺激上皮细胞模型中,A549细胞及HBE细胞经SiO2刺激后,IL-6蛋白表达上调,miR-149表达量明显下调,差异有统计学意义(P<0.01).(3)对A549细胞转染miR-149相似物及抑制剂后实验结果显示,高表达miR-149后,A549细

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