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目的 研究远隔缺血预适应(RIPC)血清外泌体对SH-SY5Y细胞基因表达的影响,探讨差异表达基因对神经细胞在糖氧剥夺(OGD)耐受中的作用.方法 RIPC前后分离人血清外泌体,取RIPC前外泌体(HuE-C)和RIPC后外泌体(HuE-RIPC).将SH-SY5Y细胞分为空白组(正常培养细胞),对照组(培养液加入HuE-C)和RIPC组(培养液加入HuE-RIPC),采用高通量测序各组细胞基因表达并进行生物信息学分析,将3组细胞置于OGD条件下,检测细胞活力,采用实时定量PCR及Western blot检测与神经低氧/缺血相关的基因表达.结果 生物信息学显示,RIPC组热休克蛋白(HSP)基因差异表达增加.MTS检测发现,OGD条件下,RIPC组细胞活力明显高于空白组(0.673±0.056 vs 0.481±0.027,P<0.01).实时定量PCR和Western blot检测显示,OGD条件下,RIPC组HSP70 mRNA表达和蛋白表达明显高于空白组和对照组(P<0.05).结论 人RIPC血清外泌体可引起众多基因表达变化,其中HSP70表达增加可能是其低氧耐受增加的一个原因.

作者:邹明新;刘晓蕾;刘娜;崔钧贺;张璞;邵国;时静华

来源:中华老年心脑血管病杂志 2021 年 23卷 3期

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作者:
邹明新;刘晓蕾;刘娜;崔钧贺;张璞;邵国;时静华
来源:
中华老年心脑血管病杂志 2021 年 23卷 3期
标签:
缺血预处理 外泌体 基因表达 HSP70热休克蛋白质类
目的 研究远隔缺血预适应(RIPC)血清外泌体对SH-SY5Y细胞基因表达的影响,探讨差异表达基因对神经细胞在糖氧剥夺(OGD)耐受中的作用.方法 RIPC前后分离人血清外泌体,取RIPC前外泌体(HuE-C)和RIPC后外泌体(HuE-RIPC).将SH-SY5Y细胞分为空白组(正常培养细胞),对照组(培养液加入HuE-C)和RIPC组(培养液加入HuE-RIPC),采用高通量测序各组细胞基因表达并进行生物信息学分析,将3组细胞置于OGD条件下,检测细胞活力,采用实时定量PCR及Western blot检测与神经低氧/缺血相关的基因表达.结果 生物信息学显示,RIPC组热休克蛋白(HSP)基因差异表达增加.MTS检测发现,OGD条件下,RIPC组细胞活力明显高于空白组(0.673±0.056 vs 0.481±0.027,P<0.01).实时定量PCR和Western blot检测显示,OGD条件下,RIPC组HSP70 mRNA表达和蛋白表达明显高于空白组和对照组(P<0.05).结论 人RIPC血清外泌体可引起众多基因表达变化,其中HSP70表达增加可能是其低氧耐受增加的一个原因.

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