目的 对APP /tau/ PS1阿尔茨海默病(AD)转基因小鼠基因型进行鉴定,并研究在其病程进展中tau蛋白的病理变化. 方法 根据PS1、APP、tau基因序列设计特异性引物,PCR扩增对三转基凶AD小鼠的基因型进行鉴定;免疫组化法对2、4、8个月龄小鼠大脑海马区tau蛋白表达进行检测;Western blot检测随着月龄增长小鼠海马组织的tau蛋白及其不同位点磷酸化水平. 结果 三转基凶小鼠基凶组PCR扩增获得片段分别为960 bp、530 bp和400 bp,与APP、PS1、tau的预期条带大小相符;免疫组化检测发现,8月龄小鼠海马CA3区tau蛋白表达的阳性区域增加;Western blot检测发现,三转基因小鼠海马区tau蛋白及其ps262、ps404、ps202位点磷酸化水平均较正常野生型小鼠升高(P＜0.01),且随月龄增长,8、12个月龄小鼠tau蛋白表达较2个月龄均增高(P＜0.01);Ps404及Ps202位点的磷酸化水平自2个月龄开始就高于野生型(P＜0.01),8个月龄时表达较2个月龄再次出现升高(P＜0.01),而Ps262位点的磷酸化水平直到12个月龄才较野生型出现显著性变化(P＜0.01). 结论 三转基凶小鼠能够稳定的遗传并表达APP/tau/PS,此三转基因动物能很好地模拟AD病tau蛋白的病理特征;tau蛋白及各位点磷酸化水平增高的时间并不一致,8个月龄可能是一个关键的时间点,这将为今后应用此动
作者：张中豪；石庆学；温蕾；应明；王奥；宋国丽
来源：中华老年医学杂志 2014 年 33卷 6期
