目的:探讨叶酸对脆性组氨酸三联体(FHIT)基因DNA甲基化、mRNA与蛋白表达以及宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采取体外细胞实验方法,对两种宫颈癌细胞C33A (HPV阴性)与CaSki(HPV16阳性)进行不同浓度叶酸干预,用活细胞计数和流式细胞术分别测定宫颈癌细胞的增殖和凋亡情况,采用甲基化特异性PCR(MSP)法测定FHIT基因启动子区CpG甲基化状态,利用Western blot和Real-time PCR方法分别检测FHIT基因蛋白和mRNA的表达水平。结果不同浓度叶酸对两种宫颈癌细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用。随着叶酸浓度增加,抑制增殖率逐渐上升(C33A:r=0.98,P<0.001;CaSki:r=0.98,P<0.001),细胞凋亡率升高(C33A:r=0.98,P<0.001;CaSki:r=0.99,P<0.001)。C33A与CaSki两种细胞在叶酸浓度为1μg/ml和10μg/ml时均呈现FHIT基因DNA甲基化阳性,100μg/ml和250μg/ml显示为部分阳性,500μg/ml和1000μg/ml时均呈甲基化阴性。不同叶酸浓度组与对照组相比,两种细胞FHIT基因的mRNA和蛋白相对表达量的差异均有统计学意义,随叶酸浓度的升高,FHIT mRNA (C33A:r=0.96,P<0.001;CaSki:r=0.94,P<0.001)及蛋白(C33A:r=0.96,P<0.001;CaSki:r=0.97,P<0.001)的表达量均呈上升趋势。
作者:高晨菲;康慧杰;白丽霞;丁玲;许娟;吴婷婷;白兰;王金桃
来源:中华流行病学杂志 2014 年 5期