目的 评价自噬在氧糖缺失早期诱发大鼠皮质神经元凋亡中的作用.方法 选择孕16～ 18 d的SD雌鼠,体重350～400 g,分离培养胎鼠原代皮质神经元,接种于培养板上,采用随机数字表法将其分为4组(n=7):对照组(C组)常规培养;氧糖缺失(OGD) 30 min组、OGD 1 h组、OGD 2 h组、OGD 3 h组将皮质神经元置于含有5％CO2-95％N2的无糖DMEM培养基中分别孵育30 min、1、2和3h;OGD+自噬诱导剂雷帕霉素组(OGD+R组)和OGD+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(OGD+ 3-MA组)分别在无糖DMEM培养基中预加入雷帕霉素(终浓度100 nmol/L)、3-甲基腺嘌呤(终浓度10mmol/L)孵育1h.处理结束后采用CCK-8法测定皮质神经元存活情况,Western blot法检测LC3Ⅱ和caspase-3的表达水平.结果 与C组比较,其余各组皮质神经元存活率降低,OGD 30 min组、OGD 1 h组、OGD 2 h组和OGD 3h组神经元LC3Ⅱ表达上调(P＜0.05),OGD+R组皮质神经元caspase-3表达差异无统计学意义(P＞0.05),其余组皮质神经元caspase-3表达上调(P＜0.05);与OGD 1 h组比较,OGD 2 h组、OGD 3 h组和OGD+ 3-MA组皮质神经元存活率降低,OGD+R组皮质神经元存活率升高,caspase-3表达下调,OGD+ 3-MA组皮质神经元caspase-3表达上调,OGD 2 h组和OGD 3 h组皮质神经元LC3Ⅱ表达下调(P＜0.05).结论 大鼠皮质神

作者：周迎；段满林

来源：中华麻醉学杂志 2014 年 34卷 12期