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目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在盐酸戊乙奎醚抑制肢体缺血再灌注大鼠肠组织自噬中的作用.方法 健康成年雄性SPF级SD大鼠64只,体重220~ 250 g,采用随机数字表法分为4组(n=16):假手术组(S组)、肢体缺血再灌注组(LIR组)、盐酸戊乙奎醚处理组(PHC组)和盐酸戊乙奎醚+PI3K抑制剂3-甲基腺嘌呤组(PM组).采用夹闭股动脉3h,再灌注4h的方法制备大鼠肢体缺血再灌注损伤模型.于再灌注前15 min时,S组和LIR组静脉注射生理盐水1 ml,PHC组静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15 mg/kg,PM组静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15 mg/kg,同时腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg.于再灌注4h时,取静脉血样,采用ELISA法测定血清内毒素(LPS)和LDH水平;取肠组织,荧光显微镜下观察自噬小体;采用Western blot法检测肠组织自噬蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3 Ⅰ(LC3 Ⅰ)和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达,计算LC3Ⅱ与LC3 Ⅰ表达水平的比值(LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ).结果 与S组比较,LIR组和PM组血清LPS和LDH水平升高,肠组织Beclin-1表达上调,LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ升高(P<0.05或0.01),自噬小体增多,PHC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与LIR组比较,PHC组血清LPS和LDH水平降低,肠组织Beclin-1表达下调,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ降低(P<0.05或0

作者:康于庆;黄再青;刘慧;何志强;朱俊峰;古妙宁

来源:中华麻醉学杂志 2016 年 36卷 8期

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作者:
康于庆;黄再青;刘慧;何志强;朱俊峰;古妙宁
来源:
中华麻醉学杂志 2016 年 36卷 8期
标签:
1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 胆碱能激动剂 四肢 再灌注损伤 肠 自噬 1-Phosphatidylinositol 3-kinase Protein-serine-threonine kinases Cholinergic agonists Extremities Reperfusion injury Intestines Autophagy
目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在盐酸戊乙奎醚抑制肢体缺血再灌注大鼠肠组织自噬中的作用.方法 健康成年雄性SPF级SD大鼠64只,体重220~ 250 g,采用随机数字表法分为4组(n=16):假手术组(S组)、肢体缺血再灌注组(LIR组)、盐酸戊乙奎醚处理组(PHC组)和盐酸戊乙奎醚+PI3K抑制剂3-甲基腺嘌呤组(PM组).采用夹闭股动脉3h,再灌注4h的方法制备大鼠肢体缺血再灌注损伤模型.于再灌注前15 min时,S组和LIR组静脉注射生理盐水1 ml,PHC组静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15 mg/kg,PM组静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15 mg/kg,同时腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg.于再灌注4h时,取静脉血样,采用ELISA法测定血清内毒素(LPS)和LDH水平;取肠组织,荧光显微镜下观察自噬小体;采用Western blot法检测肠组织自噬蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3 Ⅰ(LC3 Ⅰ)和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达,计算LC3Ⅱ与LC3 Ⅰ表达水平的比值(LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ).结果 与S组比较,LIR组和PM组血清LPS和LDH水平升高,肠组织Beclin-1表达上调,LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ升高(P<0.05或0.01),自噬小体增多,PHC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与LIR组比较,PHC组血清LPS和LDH水平降低,肠组织Beclin-1表达下调,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ降低(P<0.05或0

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