目的探讨T细胞死亡相关基因8（ TDAG8）与氧糖缺失?复糖复氧诱发大鼠神经元凋亡时内源性保护机制的关系。方法原代大鼠皮质神经元以1×105个∕ml的浓度种植于6孔板，采用随机数字表法分为5组：对照组（ C组，n＝24）、氧糖缺失?复糖复氧组（ OGD∕R组，n＝48）、TDAG8激动剂BTB09089组（BTB组，n＝24）和TDAG8?siRNA组（siRNA组，n＝24）和空白载体组（V组，n＝24）。采用无糖无血清的Locker缓冲液，在含有95％N2?5％CO2，37℃的厌氧培养箱中孵育60 min，然后正常培养的方法制备氧糖缺失?复糖复氧损伤模型。 BTB组、siRNA组和V组于复糖复氧前24 h时分别加入20μmol∕L TDAG8激动剂BTB09089、200 pmol∕L TDAG8?siRNA、6μl∕200μl转染试剂。于复糖复氧6 h时，测定神经元活力和LDH漏出量；采用实时荧光定量PCR法测定神经元TDAG8和caspase?3的mRNA表达水平；OGD∕R组分别于复糖复氧即刻、3、6、12和24 h时采用Western blot法测定TDAG8、caspase?3的表达；C组、OGD∕R组、BTB组、siRNA组和V组于复糖复氧后6 h时测定TDAG8、caspase?3、p?Akt的表达。结果 OGD∕R组复糖复氧后TDAG8表达逐渐上调， caspase?3表达于复糖复氧6 h时达峰值。与C组比较，OGD∕R组、V组和siRNA组神经元活力降低，LDH漏出量升高，神经

作者：马晓冬；邵东华；杭黎华；束薇薇；胡秀兰；罗红

来源：中华麻醉学杂志 2016 年 36卷 9期