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目的 评价Toll样受体4(TLR4)/NF-κB信号通路与丙泊酚抑制内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α释放的关系.方法 成年雄性SD大鼠,提取、培养肺泡巨噬细胞,接种于6孔板(1×106个/孔)和96孔板(1×104个/孔).采用随机数字表法分为5组(n=18):对照组(C组)PBS继续培养;二甲基亚砜组(D组)加入二甲基亚砜,终浓度5 mg/ml;LPS组(L组)加入LPS,终浓度1μg/ml;丙泊酚组(P组)加入丙泊酚,终浓度25 μmol/L(4.46 μg/ml);LPS+丙泊酚组(L+P组)加入LPS和丙泊酚,终浓度分别为1μg/ml和25μ mol/L(4.46 μg/ml).培养或孵育24 h时,采用CCK-8法检测细胞活力,采用瑞氏染色观察细胞形态变化,采用ELISA法检测上清液TNF-α浓度,采用Western blot法检测TLR4表达和NF-κB活性.结果 与C组比较,L组、L+P组细胞活力和上清液TNF-α浓度升高,TLR4表达上调,NF-κB活性增强(P<0.05),D组和P组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与L组比较,L+P组细胞活力和上清液TNF-α浓度降低,TLR4表达下调,NF-κB活性减弱(P<0.05),细胞形态变化减轻,伸出的伪足数减少.结论 丙泊酚抑制内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α释放的机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活有关.

作者:杨雪;孙赳;曾思;兰志勋

来源:中华麻醉学杂志 2017 年 37卷 6期

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作者:
杨雪;孙赳;曾思;兰志勋
来源:
中华麻醉学杂志 2017 年 37卷 6期
标签:
Toll样受体4 NF-κB 二异丙酚 内毒素类 巨噬细胞,肺泡 肿瘤坏死因子α Toll-like receptor 4 NF-kappa B Propofol Endotoxins Macrophages,alveolar Tumor necrosis factor-alpha
目的 评价Toll样受体4(TLR4)/NF-κB信号通路与丙泊酚抑制内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α释放的关系.方法 成年雄性SD大鼠,提取、培养肺泡巨噬细胞,接种于6孔板(1×106个/孔)和96孔板(1×104个/孔).采用随机数字表法分为5组(n=18):对照组(C组)PBS继续培养;二甲基亚砜组(D组)加入二甲基亚砜,终浓度5 mg/ml;LPS组(L组)加入LPS,终浓度1μg/ml;丙泊酚组(P组)加入丙泊酚,终浓度25 μmol/L(4.46 μg/ml);LPS+丙泊酚组(L+P组)加入LPS和丙泊酚,终浓度分别为1μg/ml和25μ mol/L(4.46 μg/ml).培养或孵育24 h时,采用CCK-8法检测细胞活力,采用瑞氏染色观察细胞形态变化,采用ELISA法检测上清液TNF-α浓度,采用Western blot法检测TLR4表达和NF-κB活性.结果 与C组比较,L组、L+P组细胞活力和上清液TNF-α浓度升高,TLR4表达上调,NF-κB活性增强(P<0.05),D组和P组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与L组比较,L+P组细胞活力和上清液TNF-α浓度降低,TLR4表达下调,NF-κB活性减弱(P<0.05),细胞形态变化减轻,伸出的伪足数减少.结论 丙泊酚抑制内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α释放的机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活有关.

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