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目的 探讨氢改善脓毒症小鼠肠屏障功能的机制与RhoA-mDia1信号通路的关系.方法 雄性C57BL/6小鼠60只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法分为3组(n=20):对照组(C组)、脓毒症组(S组)和脓毒症+氢气组(SH组).采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,SH组小鼠于CLP术后1和6h时分别吸入含2%氢气的空气1h.于CLP术后24 h时心脏穿刺取血标本,测定血清二胺氧化酶(DAO)活性、血液细菌培养计数菌落形成单位(CFU);取小肠组织标本,透射电镜下观察小肠上皮细胞超微结构;免疫荧光染色法测定肠上皮细胞连接蛋白ZO-1的表达与分布;Western blot法测定肠上皮细胞RhoA、肌球蛋白磷酸酯酶目标亚基1(MYPT1)及其磷酸化水平、mDia1的表达,计算p-MYPT1/MYPT1比值.结果 与C组比较,S组、SH组血清DAO活性、全血CFU计数及RhoA表达水平均升高,ZO-1表达下调,S组p-MYPT1/MYPT1比值升高,mDia1表达下调,SH组p-MYPT1/MYPT1比值下降,mDia1表达上调(P<0.05);与S组比较,SH组血清DAO活性及CFU计数、肠上皮细胞RhoA表达水平及p-MYPT1/MYPT1比值降低,ZO-1和mDia1表达上调(P<0.05),肠组织超微结构改变改善.结论 氢改善脓毒症小鼠肠屏障功能的机制与抑制肠上皮细胞RhoA活性,升高mDia1活性有关.

作者:姜连浩;张红涛;梁禹;于泳浩;余剑波

来源:中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 5期

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作者:
姜连浩;张红涛;梁禹;于泳浩;余剑波
来源:
中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 5期
标签:
氢 脓毒症 肠 Rho相关激酶 Hydrogen Sepsis Intestines Rho-associated kinases
目的 探讨氢改善脓毒症小鼠肠屏障功能的机制与RhoA-mDia1信号通路的关系.方法 雄性C57BL/6小鼠60只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法分为3组(n=20):对照组(C组)、脓毒症组(S组)和脓毒症+氢气组(SH组).采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,SH组小鼠于CLP术后1和6h时分别吸入含2%氢气的空气1h.于CLP术后24 h时心脏穿刺取血标本,测定血清二胺氧化酶(DAO)活性、血液细菌培养计数菌落形成单位(CFU);取小肠组织标本,透射电镜下观察小肠上皮细胞超微结构;免疫荧光染色法测定肠上皮细胞连接蛋白ZO-1的表达与分布;Western blot法测定肠上皮细胞RhoA、肌球蛋白磷酸酯酶目标亚基1(MYPT1)及其磷酸化水平、mDia1的表达,计算p-MYPT1/MYPT1比值.结果 与C组比较,S组、SH组血清DAO活性、全血CFU计数及RhoA表达水平均升高,ZO-1表达下调,S组p-MYPT1/MYPT1比值升高,mDia1表达下调,SH组p-MYPT1/MYPT1比值下降,mDia1表达上调(P<0.05);与S组比较,SH组血清DAO活性及CFU计数、肠上皮细胞RhoA表达水平及p-MYPT1/MYPT1比值降低,ZO-1和mDia1表达上调(P<0.05),肠组织超微结构改变改善.结论 氢改善脓毒症小鼠肠屏障功能的机制与抑制肠上皮细胞RhoA活性,升高mDia1活性有关.

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