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目的 评价冷缺血期氢预处理对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)缺氧复氧时核因子E2相关因子2(Nrf2)活性的影响.方法 雄性清洁级SD大鼠,2~3周龄,使用组织块贴壁法,提取PMVECs,采用随机数字表法分为4组(n=25):对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)、氧气组(O组)和氢气组(H组).经95%氧气-5%二氧化碳预平衡的低钾右旋糖酐液(LPD)4℃孵育4 h,模拟冷缺血期;LPD替换经95%氧气-5%二氧化碳预平衡的LPD,室温孵育1 h,模拟肺移植期;37℃M199完全培养液迅速替换LPD,在40%氧气-5%二氧化碳-55%氮气混合气体中孵育,模拟再灌注期.O组和H组于冷缺血期密闭培养箱分别通入40%氧气-60%氮气、3%氢气-40%氧气-57%氮气,每20 min置换1次.4 h后收集细胞培养液,采用ELISA法检测IL-6、IL-10、TNF-α浓度,采用硫代巴比妥酸法测定MDA浓度;提取细胞质和细胞核蛋白,采用Western blot方法测定Nrf2表达水平;分别采用流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡率.结果 与C组比较,H/R组IL-6、TNF-α和MDA水平升高,IL-10水平降低,细胞凋亡率升高,细胞核Nrf2表达上调(P<0.05);与H/R组比较,O组和H组IL-6、TNF-α和MDA水平降低,IL-10水平升高,细胞凋亡率降低,细胞质Nrf2表达下调,H组细胞核Nrf2表达上调(P<0.05),O组细胞核Nrf2表达差异无统计学意义(P

作者:李喆;康继宇;张广超;蔡海龙;周华成

来源:中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 6期

知识库介绍

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作者:
李喆;康继宇;张广超;蔡海龙;周华成
来源:
中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 6期
标签:
氢 冷缺血 微血管 内皮细胞 肺 NF-E2相关因子2 Hydrogen Cold ischemia Microvessels Endothelial cells Lung NF-E2-related factor 2
目的 评价冷缺血期氢预处理对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)缺氧复氧时核因子E2相关因子2(Nrf2)活性的影响.方法 雄性清洁级SD大鼠,2~3周龄,使用组织块贴壁法,提取PMVECs,采用随机数字表法分为4组(n=25):对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)、氧气组(O组)和氢气组(H组).经95%氧气-5%二氧化碳预平衡的低钾右旋糖酐液(LPD)4℃孵育4 h,模拟冷缺血期;LPD替换经95%氧气-5%二氧化碳预平衡的LPD,室温孵育1 h,模拟肺移植期;37℃M199完全培养液迅速替换LPD,在40%氧气-5%二氧化碳-55%氮气混合气体中孵育,模拟再灌注期.O组和H组于冷缺血期密闭培养箱分别通入40%氧气-60%氮气、3%氢气-40%氧气-57%氮气,每20 min置换1次.4 h后收集细胞培养液,采用ELISA法检测IL-6、IL-10、TNF-α浓度,采用硫代巴比妥酸法测定MDA浓度;提取细胞质和细胞核蛋白,采用Western blot方法测定Nrf2表达水平;分别采用流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡率.结果 与C组比较,H/R组IL-6、TNF-α和MDA水平升高,IL-10水平降低,细胞凋亡率升高,细胞核Nrf2表达上调(P<0.05);与H/R组比较,O组和H组IL-6、TNF-α和MDA水平降低,IL-10水平升高,细胞凋亡率降低,细胞质Nrf2表达下调,H组细胞核Nrf2表达上调(P<0.05),O组细胞核Nrf2表达差异无统计学意义(P

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