目的:评价脂氧素A4(LXA4)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞活化的影响及沉默信息调节因子1(SIRT1)/NF-κB信号通路在其中的作用。方法:实验Ⅰ:取生长状态良好的小鼠BV2小胶质细胞,采用随机数字表法分为4组(
n=30):对照组(C组)、LXA4组、LPS组和LPS+LXA4组(LL1组)。实验Ⅱ:采用随机数字表法将小胶质细胞分为2组(
n=30):LPS+LXA4组(LL2组)、LPS+LXA4+SIRT1抑制剂EX527组(LLE组)。C组正常培养;LXA4组和LPS组分别加入LXA4(终浓度100 nmol/L)、LPS(终浓度100 ng/ml)孵育24 h;LL1组和LL2组于LPS处理前1 h加入LXA4(终浓度100 nmol/L),其余处理方法同LPS组;LLE组于LXA4处理前30 min加入EX527(终浓度为5 μmol/L),其余处理方法同LL2组。采用qRT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD32、精氨酸酶1(Arg-1)、CD206以及IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10的mRNA表达,ELISA法检测上清液IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10浓度,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧(ROS)含量,WST-8法检测SOD活性,Western blot法检测NADPH氧化酶2 (NOX2)、过氧化物歧化酶1(SOD1)、血红素加氧酶-1(HO-1)、SIRT1和乙酰化NF-κB p65的表达。
结果:与C组比较,LPS组iNOS mRNA、CD32 mRNA、IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表
作者:蒋素芳;万倩;王雪吉;曹天宇;康荣田;黄立宁
来源:中华麻醉学杂志 2023 年 43卷 10期