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目的 探讨胰十二指肠同源盒1(pancreatic and duodenal homeobox 1,Pdx-1)、神经元素3(neurogenin 3,Ngn3)联合V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(v-maf muscu-loaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologA,MafA)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)分化为胰岛样细胞(insulin-producing cells,IPC)的机制.方法 通过贴壁培养法纯化BMSC,分为4组(A:未感染组;B:MafA感染组;C:Pdx-1-Ngn3感染组;D:联合感染组),高糖条件下培养7d,荧光显微镜观察其感染效率.Western印迹检测各组细胞Pdx-1、Ngn3和MafA表达情况,RT-PCR检测各组胰岛素2、葡萄糖激酶、巢蛋白、胰升糖素及Pdx-1表达水平,ELISA法检测各组胰岛素分泌情况.结果 分离的细胞表面高表达CD44、CD105,而低表达CD34.诱导过程中各感染组BMSC逐渐聚集并形成细胞团块,双硫棕染色呈红棕色;各组在感染第0、3、5、7、9天胰岛素分泌水平逐渐提高,且联合感染组升高最为明显(P<0.05);与A组相比,B、C和D组Pdx-1、胰岛素2、胰升糖素及葡萄糖激酶基因表达明显上调(P<0.05);与B组相比,C组Pdx-1表达上调,D组Pdx-1和胰岛素2表达上调,胰升糖素表达下调(P<0.05);与C组相比,D组胰升糖素表达上调(P<0.05).结论 Pdx-1、Ngn3联合MafA共同感染

作者:闫淑芳;袁慧娟;刘宏霞;杜少斐;吴敬;张会峰;马跃华;赵志刚

来源:中华内分泌代谢杂志 2015 年 31卷 10期

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闫淑芳;袁慧娟;刘宏霞;杜少斐;吴敬;张会峰;马跃华;赵志刚
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中华内分泌代谢杂志 2015 年 31卷 10期
标签:
胰十二指肠同源盒1 神经元素3 V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A 大鼠骨髓间充质干细胞 胰岛样细胞 Pancreatic and duodenal homeobox 1 Neurogenin 3 v-maf muscu-loaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A Bone marrow mesenchymal stem cells Insulin-producing cells
目的 探讨胰十二指肠同源盒1(pancreatic and duodenal homeobox 1,Pdx-1)、神经元素3(neurogenin 3,Ngn3)联合V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(v-maf muscu-loaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologA,MafA)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)分化为胰岛样细胞(insulin-producing cells,IPC)的机制.方法 通过贴壁培养法纯化BMSC,分为4组(A:未感染组;B:MafA感染组;C:Pdx-1-Ngn3感染组;D:联合感染组),高糖条件下培养7d,荧光显微镜观察其感染效率.Western印迹检测各组细胞Pdx-1、Ngn3和MafA表达情况,RT-PCR检测各组胰岛素2、葡萄糖激酶、巢蛋白、胰升糖素及Pdx-1表达水平,ELISA法检测各组胰岛素分泌情况.结果 分离的细胞表面高表达CD44、CD105,而低表达CD34.诱导过程中各感染组BMSC逐渐聚集并形成细胞团块,双硫棕染色呈红棕色;各组在感染第0、3、5、7、9天胰岛素分泌水平逐渐提高,且联合感染组升高最为明显(P<0.05);与A组相比,B、C和D组Pdx-1、胰岛素2、胰升糖素及葡萄糖激酶基因表达明显上调(P<0.05);与B组相比,C组Pdx-1表达上调,D组Pdx-1和胰岛素2表达上调,胰升糖素表达下调(P<0.05);与C组相比,D组胰升糖素表达上调(P<0.05).结论 Pdx-1、Ngn3联合MafA共同感染

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