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目的筛选出抑制血小板聚集的血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa自身抗体, 用噬菌体表面展示技术构建人源化抗血小板GPⅡb/Ⅲa单链噬菌体抗体(ScFv)库.方法用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原(MAIPA)技术和血小板聚集试验筛选出血浆中含有抑制血小板聚集的血小板GPⅡb/Ⅲa自身抗体的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者.从筛选出患者的外周血淋巴细胞中提取mRNA,用RT-PCR扩增出人免疫球蛋白的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片断,用DNA linker将VH和VL连接成ScFv基因片断.用限制性内切酶SfiⅠ/NotⅠ酶切ScFv后克隆到噬菌体载体pHEN2,然后转化大肠杆菌TG1.用辅助噬菌体M13 K07援救转化后的TG1,产生ScFv.结果 95例慢性ITP患者中 41例(43.2
作者：冀学斌；侯明；马道新；李丽珍；彭军；王琳
来源：中华内科杂志 2005 年 44卷 4期
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